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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求教--HPLC出峰时间一直前移
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头大师妹

新虫 (小有名气)

[求助] 求教--HPLC出峰时间一直前移

各位前辈，最近在跑样品时发现色谱柱出峰时间一直在提前，每次大概有个几秒的样子。 被测样品是用酶将肉类消化后取的上清液，柱子是阴离子交换柱，用提高流动相中盐浓度的方法梯度洗脱。但发现每次出目的峰的时间一直在提前，在跑完20针左右，出峰时间可以提前一分钟。我也做过多次标准品（基质是水），不会出现峰前移的情况，所以觉得不会是柱子平衡时间不够的问题。 现在初步怀疑是样品基质过于复杂，容易引起固定相结合位点的竞争，但是已经很多方法想将基质纯化，还是不行。跪求指点一般能引起这种情况的原因有哪些，可以怎么解决？不甚感激！！
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1楼 2013-09-07 07:14:37
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tianxia119wo

金虫 (正式写手)
我记得我前辈说过出峰保留时间波动10%以内貌似是可以接受的。。。
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浙大化学系本科生,希望能和各位虫友多多交流,互相帮助.
5楼2013-10-15 10:07:52
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suruiqin

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
头大师妹: 金币+2, ★有帮助 2013-09-10 13:26:18
这是周围环境的温度造成的，应该跟样品没关系，如果你一直进样，在流动相充足的情况下，你会发现下午的保留时间最少，而晚上的次之，早晨的最长。通常我们实验室的柱温箱只有升温没有降温功能，所以会造成这种结果。我每次做实验时候都会根据主峰之前的杂质峰来微调柱温的，因为杂质峰和主峰的相对保留时间是基本不变的，那样做出来的实验第一针和最后一针主峰的保留时间就不会有太大出入了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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所有的成就都源于新的挑战
2楼2013-09-07 08:51:49
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头大师妹

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by suruiqin at 2013-09-07 08:51:49
这是周围环境的温度造成的，应该跟样品没关系，如果你一直进样，在流动相充足的情况下，你会发现下午的保留时间最少，而晚上的次之，早晨的最长。通常我们实验室的柱温箱只有升温没有降温功能，所以会造成这种结果。 ...

谢谢你的答案， 我有使用柱温箱，而且尝试过在整个分析过程中控制在不同的温度，不过发现温度上升除了使柱压降低之外，对出峰时间的影响并没有很大。而且在基质干净的时候（比如只有甲醇，水）的时候就没有发生前移的状况，但是只要一上萃取液前移得就特别厉害。。。。
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3楼2013-09-07 09:15:14
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独自等待-

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你试试平衡时间长些，每个样的停止时间也再长点
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4楼2013-10-15 10:05:16
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