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153863147

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC做梯度洗脱中基线有杂峰

我在做间苯三酚中未知物质的测试,用的是C18柱,流动相为乙腈:0.1%的磷酸缓冲盐。梯度为:0-9min(乙腈0%),9-15min(乙腈50%),15-25min(乙腈80%),25-30min(乙腈80%),由于还没有买到标准品,就只测了一下样品溶液,有好多连续不断的峰,单独进了溶剂和空白都有类似的杂峰出现。换了柱子和另外一台液相色谱仪之后还是会出现杂峰。柱子也都冲洗过了。请问下哪位知道有哪些原因造成这种情况。
附图1为,样品间苯三酚的色谱峰
图2为,单独进空白的色谱峰
HPLC做梯度洗脱中基线有杂峰
图1.jpg


HPLC做梯度洗脱中基线有杂峰-1
图2.jpg
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读研虐心啊!
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
梯度的话对你流动相的要求比较高,乙腈和水的质量不行的话,也就相当于乙腈和水把杂质带进色谱柱。不知道你有机溶剂、盐和水用的是哪个牌子的?
悲催的研发!
4楼2013-09-06 16:37:22
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
153863147: 金币+1, 有帮助, 图2 就是走空针的图谱啊,磷酸盐浓度很低,应该不要紧 2013-09-06 16:25:54
楼主走空针试试 感觉是梯度峰  这个估计没法避免 还有 0-9min(乙腈0%) 这个很伤柱子哈
2楼2013-09-06 15:03:29
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153863147

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2013-09-06 15:03:29
楼主走空针试试 感觉是梯度峰  这个估计没法避免 还有 0-9min(乙腈0%) 这个很伤柱子哈

图2就是走空针的图谱啊,磷酸盐浓度很低,应该不要紧
读研虐心啊!
3楼2013-09-06 16:24:44
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153863147

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by e_liang369 at 2013-09-06 16:37:22
梯度的话对你流动相的要求比较高,乙腈和水的质量不行的话,也就相当于乙腈和水把杂质带进色谱柱。不知道你有机溶剂、盐和水用的是哪个牌子的?

应该没问题吧,一直做等度的时候都是好好的,乙腈是色谱纯,磷酸二氢钾的厂家是上海,水是娃哈哈,都是滤膜过滤和超声过的。
读研虐心啊!
5楼2013-09-06 16:46:23
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