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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC法分析中药提取物，梯度洗脱是造成较多杂质峰的主因吗？
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Movchan

金虫 (正式写手)

[交流] HPLC法分析中药提取物，梯度洗脱是造成较多杂质峰的主因吗？

中药提取物成分相对复杂，极性差异大，一般做HPLC法时常采用梯度模式，可缩短分析时间、提高效率。但有时，梯度也会引起杂质峰较多，甚至与主峰重叠；加之梯度常引起严重的基线漂移而导致重现性下降，所以一般地能用等度就尽量采用等度分析。
      最近投稿我写到“当采用梯度洗脱时，杂质峰较多且出现明显的基线漂移，影响峰面积的准确积分，。。。”，结果审稿人认为，“这段话建议作者修改。可能不会因为采用梯度洗脱，造成杂质峰较多”。
      请问虫友怎么看待此问题，欢迎大家讨论，并感谢您的宝贵意见！
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1楼 2013-01-11 10:00:30
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fxzxp

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:19:06
同意审稿人的观点。
虽然梯度洗脱会产生基线的漂移，但不会产生杂质峰。对于基线漂移可以用空白对照，在不影响检测的情况下是可以接受的。如果系统污染，往往会出现不规律的杂质峰。这样的系统得出的数据是不能接受的。
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3楼2013-01-11 10:41:26
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Cpuli87

木虫 (正式写手)
★ ★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:19:09
编辑说的有道理呢，假如说是因为梯度洗脱造成杂质峰多的话，你大可以走一针空白就知道了呢，所以还是得以实验说话的。
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4楼2013-01-11 10:44:49
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Movchan

金虫 (正式写手)
杂质峰在等度下看不到而在梯度下出现，说明等度时成分没有完全出来还是杂质峰来自柱头，空白针即可验证，赞同楼上的意见。

[ Last edited by Movchan on 2013-1-11 at 11:02 ]
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5楼2013-01-11 10:49:13
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)
★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
1）梯度洗脱的目的就是要让尽可能多的杂质峰与主峰保持较好的分离度；
2）基线漂移可用空白对照加以扣除，也可用乙腈/水作为洗脱体系，基线很好。
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14楼2013-01-11 11:58:21
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weiwei_l

木虫 (职业作家)
★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
加油楼主
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15楼2013-01-11 12:14:40
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欲飞无界

新虫 (小有名气)
★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
我在流动相改变时比例时会出一个峰，这个应该是流动相改变的一个峰，不属于杂质。因为哪怕我在冲干净的柱子的时候也会出现这个峰。梯度洗脱应该是说，在我要的峰的时候降低甲醇比例，让峰更分离，在我不需要的地方加大甲醇比例，缩短时间。所以不应该造成杂质峰增多。
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16楼2013-01-12 21:19:45
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Movchan

金虫 (正式写手)
选择甲醇/水作为流动相，在250nm检测波长下，梯度模式会不会造成较明显的基线漂移呢？
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17楼2013-01-12 23:09:18
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idea2020

铜虫 (小有名气)
★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
等度洗脱只是有些成分不能洗脱出来，梯度洗脱效果能分离的成分越多，梯度变化大时，可能其他成分会与主峰重叠。
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18楼2013-01-14 21:33:26
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yuefeiz

木虫 (初入文坛)
★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
选择甲醇/水作为流动相，在250nm检测波长下，梯度模式会造成较明显的基线漂移,乙腈/水作为流动相会稳定一些，而且梯度洗脱对水的质量要求比较高，水的质量不好，梯度的时候哪怕是空白都会出现很多杂质峰！
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19楼2013-04-28 10:28:36
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wm彼岸花

木虫 (正式写手)
★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
我也做过中药提取物梯度啊，没有发现有杂质峰，也没有严重的基线漂移
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20楼2013-04-28 11:28:31
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简单回复
茅塞顿开2楼
2013-01-11 10:25   回复  
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vgyhn6楼
2013-01-11 11:04   回复  
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顶
niezi10177楼
2013-01-11 11:07   回复  
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晕月山江8楼
2013-01-11 11:12   回复  
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hxp28009楼
2013-01-11 11:23   回复  
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shengwuwuji10楼
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wgatssd11楼
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wgatssd12楼
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yaoyao14513楼
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