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Movchan

金虫 (正式写手)


[交流] HPLC法分析中药提取物,梯度洗脱是造成较多杂质峰的主因吗?

中药提取物成分相对复杂,极性差异大,一般做HPLC法时常采用梯度模式,可缩短分析时间、提高效率。但有时,梯度也会引起杂质峰较多,甚至与主峰重叠;加之梯度常引起严重的基线漂移而导致重现性下降,所以一般地能用等度就尽量采用等度分析。
      最近投稿我写到“当采用梯度洗脱时,杂质峰较多且出现明显的基线漂移,影响峰面积的准确积分,。。。”,结果审稿人认为,“这段话建议作者修改。可能不会因为采用梯度洗脱,造成杂质峰较多”。
      请问虫友怎么看待此问题,欢迎大家讨论,并感谢您的宝贵意见!
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Movchan

金虫 (正式写手)


选择甲醇/水作为流动相,在250nm检测波长下,梯度模式会不会造成较明显的基线漂移呢?
17楼2013-01-12 23:09:18
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fxzxp

铁杆木虫 (小有名气)


★ ★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:19:06
同意审稿人的观点。
虽然梯度洗脱会产生基线的漂移,但不会产生杂质峰。对于基线漂移可以用空白对照,在不影响检测的情况下是可以接受的。如果系统污染,往往会出现不规律的杂质峰。这样的系统得出的数据是不能接受的。
3楼2013-01-11 10:41:26
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Cpuli87

木虫 (正式写手)


★ ★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:19:09
编辑说的有道理呢,假如说是因为梯度洗脱造成杂质峰多的话,你大可以走一针空白就知道了呢,所以还是得以实验说话的。
4楼2013-01-11 10:44:49
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Movchan

金虫 (正式写手)


杂质峰在等度下看不到而在梯度下出现,说明等度时成分没有完全出来还是杂质峰来自柱头,空白针即可验证,赞同楼上的意见。

[ Last edited by Movchan on 2013-1-11 at 11:02 ]
5楼2013-01-11 10:49:13
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