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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC法分析中药提取物，梯度洗脱是造成较多杂质峰的主因吗？
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Movchan

金虫 (正式写手)

[交流] HPLC法分析中药提取物，梯度洗脱是造成较多杂质峰的主因吗？

中药提取物成分相对复杂，极性差异大，一般做HPLC法时常采用梯度模式，可缩短分析时间、提高效率。但有时，梯度也会引起杂质峰较多，甚至与主峰重叠；加之梯度常引起严重的基线漂移而导致重现性下降，所以一般地能用等度就尽量采用等度分析。
      最近投稿我写到“当采用梯度洗脱时，杂质峰较多且出现明显的基线漂移，影响峰面积的准确积分，。。。”，结果审稿人认为，“这段话建议作者修改。可能不会因为采用梯度洗脱，造成杂质峰较多”。
      请问虫友怎么看待此问题，欢迎大家讨论，并感谢您的宝贵意见！
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1楼 2013-01-11 10:00:30
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欲飞无界

新虫 (小有名气)
★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
我在流动相改变时比例时会出一个峰，这个应该是流动相改变的一个峰，不属于杂质。因为哪怕我在冲干净的柱子的时候也会出现这个峰。梯度洗脱应该是说，在我要的峰的时候降低甲醇比例，让峰更分离，在我不需要的地方加大甲醇比例，缩短时间。所以不应该造成杂质峰增多。
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16楼2013-01-12 21:19:45
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fxzxp

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:19:06
同意审稿人的观点。
虽然梯度洗脱会产生基线的漂移，但不会产生杂质峰。对于基线漂移可以用空白对照，在不影响检测的情况下是可以接受的。如果系统污染，往往会出现不规律的杂质峰。这样的系统得出的数据是不能接受的。
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3楼2013-01-11 10:41:26
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Cpuli87

木虫 (正式写手)
★ ★
Movchan(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1 2013-01-13 12:19:09
编辑说的有道理呢，假如说是因为梯度洗脱造成杂质峰多的话，你大可以走一针空白就知道了呢，所以还是得以实验说话的。
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4楼2013-01-11 10:44:49
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Movchan

金虫 (正式写手)
杂质峰在等度下看不到而在梯度下出现，说明等度时成分没有完全出来还是杂质峰来自柱头，空白针即可验证，赞同楼上的意见。

[ Last edited by Movchan on 2013-1-11 at 11:02 ]
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5楼2013-01-11 10:49:13
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