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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC梯度洗脱双峰分离问题
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lingble

银虫 (初入文坛)

[求助] HPLC梯度洗脱双峰分离问题

HPLC检测采用乙腈磷酸系统梯度洗脱。流动相：0-20min：15%-100%乙腈；20-22min100%-15%乙腈，22-30min15%乙腈。
在19min左右有两个相连的峰出现。HPLC图如下。
如何调整梯度完全分离这两个峰？
HPLC梯度洗脱双峰分离问题
tAC.png
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1楼 2013-09-06 14:48:47
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lingble

银虫 (初入文坛)
补充：
如采用等度55%乙腈系统，两个峰合并为一，在20min左右出峰。65%乙腈系统在7min左右出峰。
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2楼2013-09-06 15:14:54
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lingble

银虫 (初入文坛)
补充：
TLC点板后确定又两个斑点，RF相近。两个斑点在HPLC上出峰时间基本一致。
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3楼2013-09-06 15:24:48
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lingble

银虫 (初入文坛)
帮忙 帮忙 帮忙啊
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4楼2013-09-06 16:50:48
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baby88

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lingble: 金币+5, ★★★很有帮助, 基本答案都差不多,作为第一个,就给5个 2013-09-09 09:11:45
release53: 金币+1, 辛苦啦 2013-09-09 09:31:56
可以试着将乙腈起始浓度提高，时间拉长到30min或更长点。您用两个比例的等度洗脱时也是双峰？
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5楼2013-09-06 18:43:12
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wx_55

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
0-20min改为0-30或更长时间，洗脱的极性降低，使出峰时间延长从而达到两个峰分离的目的

[ 发自小木虫客户端 ]
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6楼2013-09-06 22:27:02
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yaomengche

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
将时间拉长一些就ok了
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7楼2013-09-08 16:13:18
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刘水兵

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有机相比例比较上升时可以把整个缩短点试试，整个梯度调节下看看，或者是把有机相换下试试！！！
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知识永远是源动力！！
8楼2013-09-09 08:56:08
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lingble

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by baby88 at 2013-09-06 18:43:12
可以试着将乙腈起始浓度提高，时间拉长到30min或更长点。您用两个比例的等度洗脱时也是双峰？

等度洗脱只有一个峰
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9楼2013-09-09 09:12:26
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lingble

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 刘水兵 at 2013-09-09 08:56:08
有机相比例比较上升时可以把整个缩短点试试，整个梯度调节下看看，或者是把有机相换下试试！！！

不太明白，是把有机相梯度上升时的时间缩短吗？整个梯度的调节主要关注哪方面呢？是延长洗脱时间吗？还是梯度放缓？
换下有机相的话，可以换哪些？甲醇？？
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10楼2013-09-09 09:35:26
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