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zlong2008木虫 (正式写手)
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[求助]
关于HPLC保留时间的问题
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| 这几天一直在做hplc.但是每天的标准品保留时间都不一样，而且是越来越长。最短的和最长的能够相差将近20分钟，刚开始没有用柱温箱，今天用了，柱压明显降低，但是保留时间却比没有用柱温箱的时候延长了。流动相是一样的，进样量也是一样的，请问问题出在哪里啊。是不是色谱柱有问题了啊。 |
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2楼2011-10-15 14:57:56
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3楼2011-10-15 15:26:16
4楼2011-10-15 16:43:15
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【答案】应助回帖
zlong2008(金币+1): 谢谢，这些问题以前没有考虑到 2011-10-19 16:57:02
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首先一个是流动相的准确性，有些物质对流动相比例要求很高，所谓差之毫厘，谬以千里，而且你是梯度洗脱，不知道你有没有使用缓冲盐？（我以前做过厄贝沙坦的方法摸索，有一个缓冲盐配得差一点，时间就差得离谱） 其次系统是否存在漏液现象，有漏液的话，保留时间相差也会千奇百怪的，这个峰面积会有所体现（如果进样用样品浓度一致的话） 第三，柱压，你这个柱压差得太离谱了，Agilent的柱压一般都很稳定的，岛津的波动可能大点，但是相差50，肯定是有系统原因的绝对不是偶然因素。 第四就是柱效了，有没有观察柱效啊，柱效有没有波动？ |
8楼2011-10-17 01:06:19
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9楼2011-10-17 01:08:22
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