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zlong2008

木虫 (正式写手)

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[求助] 关于HPLC保留时间的问题

这几天一直在做hplc.但是每天的标准品保留时间都不一样，而且是越来越长。最短的和最长的能够相差将近20分钟，刚开始没有用柱温箱，今天用了，柱压明显降低，但是保留时间却比没有用柱温箱的时候延长了。流动相是一样的，进样量也是一样的，请问问题出在哪里啊。是不是色谱柱有问题了啊。

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在压力中前进

1楼 2011-10-15 14:20:54

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2楼: Originally posted by yumulin at 2011-10-15 14:57:56:
柱压在每一次都是一致的么？如果柱子不稳定，设一个梯度冲下柱子吧，最终冲洗比例是你流动相的比例，然后换上你的流动相。

今天的柱压都很稳定的，我用的是梯度洗脱，并且每次用完后，都用最初的流动相比例冲柱子，每次做完实验都按照说明书的要求做的。保留时间相差这么大很郁闷啊。

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在压力中前进

3楼2011-10-15 15:26:16

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4楼: Originally posted by alexsz1985 at 2011-10-15 16:43:15:
如果进样量、温度和其他参数都一样，而同一个样品的保留时间相差这么大，我觉得可能是色谱柱的问题，建议先等梯度跑标准品，调整流动相比例使得样品在10～20min之间出峰，然后重复进样5次，看看保留时间相差多少。 ...

你好，今天的柱压又有问题了，昨天用保温箱柱压一直在１００左右，而今天柱压却倒了１５０左右，难道真的是柱子有问题了啊，没有用柱温箱的时候柱压也是１５０左右。

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在压力中前进

5楼2011-10-16 10:37:08

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