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lingble

银虫 (初入文坛)

[求助] HPLC梯度洗脱双峰分离问题

HPLC检测采用乙腈磷酸系统梯度洗脱。流动相:0-20min:15%-100%乙腈;20-22min100%-15%乙腈,22-30min15%乙腈。
在19min左右有两个相连的峰出现。HPLC图如下。
如何调整梯度完全分离这两个峰?
HPLC梯度洗脱双峰分离问题
tAC.png
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lingble

银虫 (初入文坛)

补充:
如采用等度55%乙腈系统,两个峰合并为一,在20min左右出峰。65%乙腈系统在7min左右出峰。
2楼2013-09-06 15:14:54
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lingble

银虫 (初入文坛)

补充:
TLC点板后确定又两个斑点,RF相近。两个斑点在HPLC上出峰时间基本一致。
3楼2013-09-06 15:24:48
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lingble

银虫 (初入文坛)

帮忙 帮忙 帮忙啊
4楼2013-09-06 16:50:48
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baby88

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lingble: 金币+5, ★★★很有帮助, 基本答案都差不多,作为第一个,就给5个 2013-09-09 09:11:45
release53: 金币+1, 辛苦啦 2013-09-09 09:31:56
可以试着将乙腈起始浓度提高,时间拉长到30min或更长点。您用两个比例的等度洗脱时也是双峰?
5楼2013-09-06 18:43:12
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wx_55

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
0-20min改为0-30或更长时间,洗脱的极性降低,使出峰时间延长从而达到两个峰分离的目的

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2013-09-06 22:27:02
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yaomengche

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
将时间拉长一些就ok了
7楼2013-09-08 16:13:18
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刘水兵

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有机相比例比较上升时可以把整个缩短点试试,整个梯度调节下看看,或者是把有机相换下试试!!!
知识永远是源动力!!
8楼2013-09-09 08:56:08
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lingble

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by baby88 at 2013-09-06 18:43:12
可以试着将乙腈起始浓度提高,时间拉长到30min或更长点。您用两个比例的等度洗脱时也是双峰?

等度洗脱只有一个峰
9楼2013-09-09 09:12:26
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lingble

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 刘水兵 at 2013-09-09 08:56:08
有机相比例比较上升时可以把整个缩短点试试,整个梯度调节下看看,或者是把有机相换下试试!!!

不太明白,是把有机相梯度上升时的时间缩短吗?整个梯度的调节主要关注哪方面呢?是延长洗脱时间吗?还是梯度放缓?
换下有机相的话,可以换哪些?甲醇??
10楼2013-09-09 09:35:26
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