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[求助]
DGGE新手求助
小木虫新手,DGGE新手求助!
样品:16S rRNA基因V3片段扩增 分别为两个不同的样品
胶:8%胶,梯度浓度27%-52%
跑胶:150V,4小时
染色:EB染色
第一次做DGGE,结果如下,急求助两个问题,望高手赐教!
1 条带不是很明显,不sharp,为什么呢?如果是因为EB敏感性不够高的话,用SYBR,Gelstain,还是银染哪个方法更好呢?
2 paper上报到最好的方法是电压*时间=1000,但是我如果跑更久时间的话,似乎会跑出胶去。这两张图片跑胶的程度为蓝色的溴酚蓝刚刚跑出胶。达不到那个公式,这是什么原因造成的呢?
多谢高手指点,不甚感激啊!~
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1.jpg
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2.png |
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