应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有做DGGE的虫友们来帮帮忙啊
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
181/2返回列表12下一页
查看: 1859  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

惟我独尊

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有做DGGE的虫友们来帮帮忙啊 已有3人参与

本人正DGGE几个月了 经历了艰难险阻终于到了切胶回收测序这一步了。呵呵 ，请问大家做DGGE的切胶回收步骤都是怎么做的 啊？有没有专门的DGGE胶回收试剂盒啊，我知道有卖琼脂糖和聚丙烯酰胺胶回收试剂盒的 ， 能用来做DGGE胶回收吗？如果没有试剂盒，大家都是怎么做的啊 ，谢谢指导啊。期待中。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-23 16:31:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

526378054

金虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1):欢迎分享经验！ 2010-08-23 21:01:15
惟我独尊(金币+2):谢谢你的及时回复 2010-08-27 10:46:05
我们实验室就是没有胶回收试剂盒，我们一般用枪头切胶，于TE中过夜，第二天做PCR（带GC夹子的引物），然后再DGGE检验是否纯带，若纯就再次PCR（不带GC夹子），这样就可以把PCR产物送去测序了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-08-23 17:37:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惟我独尊

金虫 (小有名气)
谢谢楼上的帮助，再弱弱的问一句：你们最初做ＤＧＧＥ的上样ＤＮＡ样品的ＰＣＲ引物也用的带ＧＣ夹子的吗，我的没用　会有很大影响吗？
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-23 23:04:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

526378054

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 惟我独尊 at 2010-08-23 23:04:40:
谢谢楼上的帮助，再弱弱的问一句：你们最初做ＤＧＧＥ的上样ＤＮＡ样品的ＰＣＲ引物也用的带ＧＣ夹子的吗，我的没用　会有很大影响吗？

做DGGE上样用的PCR都要用GC夹子吧！不用的话是做不出来的！
赞一下 回复此楼
4楼2010-08-24 11:45:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jndxmmc

新虫 (小有名气)
★
silicare(金币+1):鼓励交流 2010-08-25 12:13:46
惟我独尊(金币+1):谢谢 2010-08-27 10:46:43
用小刀在在紫外下直接割胶于TE中过夜，第二天 60度温浴，做PCR（带GC夹子），再DGGE检验是否单挑带，如果是，重复割胶回收，用不带GC的引物PCR，PCR产物送去测序
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-08-25 10:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crydevil

金虫 (小有名气)
惟我独尊(金币+1): 2010-08-27 10:46:53
我是切下来之后放入无菌水 轻轻捣碎胶块，然后在冰箱中反复冻融几次，第二天以上清液做模板P就好了。很简单的
赞一下 回复此楼
6楼2010-08-25 14:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惟我独尊

金虫 (小有名气)
嘿嘿 知道了 谢谢大家的帮助啊
:
赞一下 回复此楼
7楼2010-08-27 10:45:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惟我独尊

金虫 (小有名气)
还有 如果第二次做DGGE发现不是一条带怎么办？要把第二次的多条带都割胶PCR测序？
赞一下 回复此楼
8楼2010-08-27 10:48:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crydevil

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 惟我独尊 at 2010-08-27 10:48:16:
还有 如果第二次做DGGE发现不是一条带怎么办？要把第二次的多条带都割胶PCR测序？

那就反复做P 直到分出单一条带
赞一下 回复此楼
9楼2010-08-28 09:30:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惟我独尊

金虫 (小有名气)

染色问题

继续请教大家一下，大家都是用什么染色方法啊，银染？EB还是SYBRGree1？银染比较简单，不用成像，但好像有的文献说银染后不能用于割胶测序是这样的ma ?
赞一下 回复此楼
10楼2010-08-30 11:15:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 惟我独尊 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302分求调剂 一志愿安徽大学085601 +8 zyx上岸！ 2026-04-04 8/400 2026-04-05 23:08 by lbsjt
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +13 洛神哥哥 2026-04-03 13/650 2026-04-05 17:27 by zzx2138
[考研] 070300化学求调剂 +17 小黄鸭宝 2026-03-30 17/850 2026-04-05 12:03 by 宁馨哈哈
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 23:10 by 无际的草原
[考研] 考研调剂 +5 四川王涛 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:18 by 啵啵啵0119
[考研] 材料专硕306英一数二 +8 z1z2z3879 2026-03-31 8/400 2026-04-04 22:08 by hemengdong
[考研] 085400电子信息319求调剂（接受跨专业调剂） +5 星星不眨眼喽 2026-04-03 6/300 2026-04-04 21:50 by hemengdong
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 298求调剂 +5 zzz，，r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 293分求调剂，外语为俄语 +6 加一一九 2026-03-31 6/300 2026-04-04 14:57 by 聪明的大松鼠
[考研] 325求调剂 +4 春风不借意 2026-04-04 4/200 2026-04-04 14:46 by 湘农储能材料
[考研] 考研调剂 +4 zybz冲冲冲 2026-04-03 6/300 2026-04-04 13:08 by zybz冲冲冲
[考研] 求调剂 +3 wos666 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:16 by gswylq
[考研] 求调剂 +4 压力??大 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:36 by 啵啵啵0119
[考研] 312 化工或制药调剂 +8 小小墨123 2026-04-02 9/450 2026-04-03 09:12 by zhouxiaoyu
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业 +6 what张 2026-04-01 7/350 2026-04-02 16:48 by zzsw+
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
[考研] 土木304求调剂 +6 兔突突突， 2026-03-31 7/350 2026-04-02 09:06 by coolminer
[考研] 一志愿北京科技，085601总分305求调剂 +9 半生瓜！ 2026-04-01 11/550 2026-04-02 08:28 by Wang200018
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭