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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » DGGE条带问题
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liqingabcd

铜虫 (小有名气)

[交流] DGGE条带问题

最近做了几个DGGE，结果图像都是这个样子，愁死了，不知道怎么办了，大家有碰到过这种情况的吗？以前都没有这种情况，谢谢了！
DGGE条带问题
20130820-1.JPG
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1楼 2013-08-24 14:36:54
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liqingabcd

铜虫 (小有名气)
胶图上的那个亮带都跑不下去，怎么办啊。。
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2楼2013-08-24 14:38:15
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Microstar

木虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
2楼: Originally posted by liqingabcd at 2013-08-24 14:38:15
胶图上的那个亮带都跑不下去，怎么办啊。。

楼主加了多少PCR样品？在几次重复实验中有没有试着减小加样量或者减小胶的浓度？
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3楼2013-08-26 01:10:45
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liqingabcd

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Microstar at 2013-08-26 01:10:45
楼主加了多少PCR样品？在几次重复实验中有没有试着减小加样量或者减小胶的浓度？...

是上样40ulPCR产物的，之前一直是上样这个浓度，没有减少过上样浓度。胶浓度是10%，之前做的都没有上面那个亮带，就这几天做的一直有那条亮带。
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4楼2013-08-26 13:28:11
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开云者

铜虫 (正式写手)
★
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1：加大上样量，50微升或者用PCR更好的产品，比如THERMO的K1081.
2:一定要把你的胶浓度扩大，你的太小了，都跑出去了
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5楼2013-08-28 11:50:07
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ycj0746

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
估计上样10ul左右即可,
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6楼2013-08-28 21:16:29
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