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[求助]
蛋白分离纯化
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| 现在做分离纯化，用的离子交换层析，穿过液中没有我的目的蛋白，说明已经挂在柱子上了，但是洗脱的时候也看不到我的目的蛋白了，洗脱时是用的0-0.5M的NaCl，然后用2M NaCl洗，都没有我的目的蛋白，有谁知道这是什么原因啊。。。真的是快被这个分离纯化搞疯了了，哪位大侠懂啊，帮帮忙啊，谢谢啦 |
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 分子生化实验经验积累 |
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【答案】应助回帖
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-26 18:42:55
飘零的叶子: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-08-28 11:12:06
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-26 18:42:55
飘零的叶子: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-08-28 11:12:06
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上样液含有自来水 或者上样液酸性而用铁棍搅拌都有可能引入铁离子。 具体的洗脱理论指导，我也不懂，做的还太少。而我这个其实没怎么关注过洗脱液的pH。 建议的那个不同pH测静态吸附率的方法还是很简单的； 另外有可能就是你的树脂已经不行了，你可以联系厂家看有没有专有的再生方法，或者就是你的树脂针对你的样品使用次数已经寿终正寝了。（或者你把型号讲一讲）。 |
10楼2013-08-26 13:28:27
2楼2013-08-24 10:35:43
3楼2013-08-24 11:29:48
4楼2013-08-24 12:35:16