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日月当空

铁虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳 染色

SDS-PAGE电泳除了用考马斯染色还有什么别的染色方法?我想把目的条带切下来,进行下一步实验。但是考马斯与蛋白质结合的太牢固了。有没有别的染料?还有,切下来的胶怎么脱色脱盐,具体步骤是什么?
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-23 13:18:19
考马斯亮蓝与蛋白质结合是可逆的,可以完全脱色。甲醇就可以脱色。
2楼2013-07-23 10:50:52
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myprayer

专家顾问 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
日月当空(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助!热心斑斑! 2013-07-23 11:47:32
配脱色液脱色呀,脱色液 冰醋酸和乙醇(或者甲醇)80 250ml 然后用ddH2O定容到1000ml
放在摇床上的时候要轻摇然后期间更换脱色液2-3次
还有考马斯亮蓝是很不错的染色液。
3楼2013-07-23 11:15:03
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zhleiD

铜虫 (初入文坛)

你是说蛋白条带如何去除颜色对吧?用碳酸氢铵,你可以看一下,打质谱的时候胶是如何处理的。
4楼2013-07-23 15:01:16
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日月当空

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhleiD at 2013-07-23 15:01:16
你是说蛋白条带如何去除颜色对吧?用碳酸氢铵,你可以看一下,打质谱的时候胶是如何处理的。

是啊,就是蛋白条带脱色。您能说一下具体方法吗?质谱什么的我不懂啊,准备送到外面去做,但是需要脱盐、脱色等前处理
5楼2013-07-24 13:38:24
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