24小时热门版块排行榜    

查看: 1415  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

[求助] qPCR的怪异结果

各位大神好啊,我昨天做了qpcr,图呢意外没有保存下来~~~那我简要描述下我的结果吧,一共六个样,GAPDH~扩增的Rn-循环数图:前面有一小点可忽略的波折,后面很长的直线,然后一致的对数上升,平台有一点差异,Ct值五个在14.7,一个在15.1;溶解曲线:先是超级高的峰,其下有几个小峰,然后直线,在80的位置有个50以下的峰,其下也有两个小峰。拿这个结果跑琼脂糖胶,单一条带~~~~~~测下cDNA浓度都在120以上,qpcr模板都是两微升,帮忙分析下原因吧,谢谢哈
回复此楼
努力打败一切
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-21 23:10:47
肯定是有非特异的扩增,只不过跑电泳看不到而已

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2013-07-21 21:03:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

唐朝豪放男

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 对头,引物不能反复冻融 2013-07-19 12:04:20
引物反复冻融多次,已经变质了,你80的峰是引物二聚体

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-07-19 09:00:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 唐朝豪放男 at 2013-07-19 09:00:59
引物反复冻融多次,已经变质了,你80的峰是引物二聚体

可是普通PCR为什么看不出来呢,而且上次用了别的实验室的体系,做出来没有那种奇怪的峰
努力打败一切
4楼2013-07-23 00:07:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-07-21 21:03:54
肯定是有非特异的扩增,只不过跑电泳看不到而已

是吗?可是~上次换了体系没问题了,那个非特异的不见了,只有80的了。可是这次又是这样了,郁闷啊~~~~还有,为啥我的另外的引物,溶解曲线出现倒峰,而且吧非特异峰多,不同样品溶解曲线峰值还不在同一点上,为嘛啊?引物不行吗?
努力打败一切
5楼2013-07-23 00:11:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 4/200 2026-03-16 23:52 by zbzihdhd
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀! 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
信息提示
请填处理意见