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yangjingjing木虫 (正式写手)
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[求助]
qPCR的怪异结果
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| 各位大神好啊，我昨天做了qpcr，图呢意外没有保存下来~~~那我简要描述下我的结果吧，一共六个样，GAPDH~扩增的Rn-循环数图：前面有一小点可忽略的波折，后面很长的直线，然后一致的对数上升，平台有一点差异，Ct值五个在14.7，一个在15.1；溶解曲线：先是超级高的峰，其下有几个小峰，然后直线，在80的位置有个50以下的峰，其下也有两个小峰。拿这个结果跑琼脂糖胶，单一条带~~~~~~测下cDNA浓度都在120以上，qpcr模板都是两微升，帮忙分析下原因吧，谢谢哈 |
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yb19841014
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【答案】应助回帖
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-21 23:10:47
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-21 23:10:47
| 肯定是有非特异的扩增，只不过跑电泳看不到而已 |
yangjingjing3楼2013-07-21 21:03:54
【答案】应助回帖
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myprayer: 金币+1, 对头，引物不能反复冻融 2013-07-19 12:04:20
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myprayer: 金币+1, 对头，引物不能反复冻融 2013-07-19 12:04:20
| 引物反复冻融多次，已经变质了，你80的峰是引物二聚体 |
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2楼2013-07-19 09:00:59
yangjingjing
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4楼2013-07-23 00:07:48
yangjingjing
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5楼2013-07-23 00:11:06
