24小时热门版块排行榜    

查看: 1411  |  回复: 4

yangjingjing

木虫 (正式写手)

[求助] qPCR的怪异结果

各位大神好啊,我昨天做了qpcr,图呢意外没有保存下来~~~那我简要描述下我的结果吧,一共六个样,GAPDH~扩增的Rn-循环数图:前面有一小点可忽略的波折,后面很长的直线,然后一致的对数上升,平台有一点差异,Ct值五个在14.7,一个在15.1;溶解曲线:先是超级高的峰,其下有几个小峰,然后直线,在80的位置有个50以下的峰,其下也有两个小峰。拿这个结果跑琼脂糖胶,单一条带~~~~~~测下cDNA浓度都在120以上,qpcr模板都是两微升,帮忙分析下原因吧,谢谢哈
回复此楼
努力打败一切
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

唐朝豪放男

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 对头,引物不能反复冻融 2013-07-19 12:04:20
引物反复冻融多次,已经变质了,你80的峰是引物二聚体

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-07-19 09:00:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-21 23:10:47
肯定是有非特异的扩增,只不过跑电泳看不到而已

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2013-07-21 21:03:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 唐朝豪放男 at 2013-07-19 09:00:59
引物反复冻融多次,已经变质了,你80的峰是引物二聚体

可是普通PCR为什么看不出来呢,而且上次用了别的实验室的体系,做出来没有那种奇怪的峰
努力打败一切
4楼2013-07-23 00:07:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-07-21 21:03:54
肯定是有非特异的扩增,只不过跑电泳看不到而已

是吗?可是~上次换了体系没问题了,那个非特异的不见了,只有80的了。可是这次又是这样了,郁闷啊~~~~还有,为啥我的另外的引物,溶解曲线出现倒峰,而且吧非特异峰多,不同样品溶解曲线峰值还不在同一点上,为嘛啊?引物不行吗?
努力打败一切
5楼2013-07-23 00:11:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yangjingjing 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +3 大火山小火山 2026-03-16 5/250 2026-03-16 16:54 by barlinike
[考研] 309求调剂 +5 花与叶@ 2026-03-10 5/250 2026-03-16 14:13 by 哦哦123
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 26考研调剂 +3 ying123. 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:18 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[基金申请] 提交后的基金本子,已让学校撤回了,可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
[考研] 一志愿:武汉理工,材料工程,英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
[硕博家园] 木虫好像不热闹了,是不是? +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
请填处理意见