24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1457  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

[求助] qPCR的怪异结果

各位大神好啊,我昨天做了qpcr,图呢意外没有保存下来~~~那我简要描述下我的结果吧,一共六个样,GAPDH~扩增的Rn-循环数图:前面有一小点可忽略的波折,后面很长的直线,然后一致的对数上升,平台有一点差异,Ct值五个在14.7,一个在15.1;溶解曲线:先是超级高的峰,其下有几个小峰,然后直线,在80的位置有个50以下的峰,其下也有两个小峰。拿这个结果跑琼脂糖胶,单一条带~~~~~~测下cDNA浓度都在120以上,qpcr模板都是两微升,帮忙分析下原因吧,谢谢哈
回复此楼
努力打败一切
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 唐朝豪放男 at 2013-07-19 09:00:59
引物反复冻融多次,已经变质了,你80的峰是引物二聚体

可是普通PCR为什么看不出来呢,而且上次用了别的实验室的体系,做出来没有那种奇怪的峰
努力打败一切
4楼2013-07-23 00:07:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

唐朝豪放男

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 对头,引物不能反复冻融 2013-07-19 12:04:20
引物反复冻融多次,已经变质了,你80的峰是引物二聚体

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-07-19 09:00:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-21 23:10:47
肯定是有非特异的扩增,只不过跑电泳看不到而已

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2013-07-21 21:03:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-07-21 21:03:54
肯定是有非特异的扩增,只不过跑电泳看不到而已

是吗?可是~上次换了体系没问题了,那个非特异的不见了,只有80的了。可是这次又是这样了,郁闷啊~~~~还有,为啥我的另外的引物,溶解曲线出现倒峰,而且吧非特异峰多,不同样品溶解曲线峰值还不在同一点上,为嘛啊?引物不行吗?
努力打败一切
5楼2013-07-23 00:11:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +12 哇呼哼呼哼 2026-04-01 13/650 2026-04-07 10:02 by zhen~
[考研] 283分求调剂 +11 试试看呗 2026-04-04 11/550 2026-04-07 09:52 by 猪会飞
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +7 墨彧 yuyu 2026-04-06 7/350 2026-04-07 08:58 by Jaylen.
[考研] 081200-11408-367学硕求调剂 +4 1_2_3111 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:13 by jp9609
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 086000生物与医药求调剂 +3 老天眷顾之人 2026-03-31 3/150 2026-04-05 22:24 by syh9288
[考研] 324求调剂 +9 想上学求调 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:57 by 果冻大王
[考研] 材料科学与工程考研 +10 拯救皮特托先生 2026-04-02 10/500 2026-04-03 23:57 by userper
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-03 3/150 2026-04-03 23:01 by qzxyhcsy
[考研] 286求调剂 +8 lim0922 2026-04-02 8/400 2026-04-03 20:19 by rzh123456
[考研] 274求调剂 +9 顺理成张 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:10 by 啊俊!
[考研] 求调剂不挑专业 +3 xrh030412 2026-04-01 3/150 2026-04-03 14:40 by 氮气气气
[考研] 求材料调剂 一志愿南昌大学 328分 +5 yyy..... 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:46 by 百灵童888
[考研] 315分 085602 求调剂 +15 26考研上岸版26 2026-04-02 15/750 2026-04-03 12:45 by xingguangj
[考研] 材料调剂 +4 一样YWY 2026-04-03 4/200 2026-04-03 09:48 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿陕西师范大学生物学317分 +5 1563日。 2026-04-02 5/250 2026-04-03 06:58 by ilovexiaobin
[考研] 交通运输考试264分求工科调剂 +4 jike777 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:53 by zllcz
[考研] 348求调剂 +11 zzzzyk123 2026-04-01 11/550 2026-04-02 16:52 by Wang200018
[考研] 285求调剂 +14 AZMK 2026-04-02 14/700 2026-04-02 15:54 by 上九天揽月(好
[考研] 08开头看过来!!! +4 wwwwffffff 2026-03-31 6/300 2026-04-02 11:42 by 均值回归
信息提示
请填处理意见