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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » HPLC跑空白样，这样的结果实在很怪异、、、
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bainaling

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] HPLC跑空白样，这样的结果实在很怪异、、、

最近跑液相准备做待测样品的标准曲线，但是发现跑出来的图中总有杂峰，各种排查后猜测会不会是流动相甲醇的吸收峰（虽然按说应该是不可能的，因为跑时都扣除了流动相的吸收峰的）。我用的是新买的安捷伦的液相小瓶，新开封的天津四友的色谱纯甲醇，流动相甲醇：水=95:5，流动相用前都抽滤的，检测波长为225nm，进样20微升的醇甲醇，居然还检测到了吸收峰、、、、为毛啊这是为毛、、、
HPLC跑空白样，这样的结果实在很怪异、、、
methanol.jpg
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1楼 2013-07-16 17:00:21
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wadecao

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
bainaling: 金币+1, ★有帮助 2013-07-16 20:29:24
本帖内容被屏蔽
2楼2013-07-16 17:23:59
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bainaling

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wadecao at 2013-07-16 17:23:59
你把管路以及进样针用异丙醇好好清洗清洗，也许是之前的某些位置有残留。进样的是不是色谱级甲醇？

请问关于管路怎么用异丙醇洗呢？作为流动相冲么？进样的是新开口的色谱甲醇的。谢谢~
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3楼2013-07-16 20:30:30
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wadecao

禁虫 (正式写手)
★
bainaling: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-16 23:04:11
本帖内容被屏蔽
4楼2013-07-16 21:44:11
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zhang1zheng2

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
bainaling: 金币+1, ★有帮助 2013-07-16 23:03:48
你用的柱子有问题吧？换同事的柱子试试,看看还有没有这个峰
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手握日月摘星辰，看透生死破凡尘
5楼2013-07-16 22:22:16
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bainaling

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhang1zheng2 at 2013-07-16 22:22:16
你用的柱子有问题吧？换同事的柱子试试,看看还有没有这个峰

我准备请我同学帮忙跑一个呢 谢谢！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2013-07-16 23:03:22
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bainaling

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wadecao at 2013-07-16 21:44:11
可以作为流动相冲洗的，也可以用注射器一截一截冲洗管道，这需要卸开一些地方。特别是进样针那里，好好洗一下。...

嗯 准备回头试试，非常感谢呢～

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2013-07-16 23:04:40
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mada1986

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
bainaling: 金币+1, ★有帮助 2013-07-17 16:32:23
柱子不干净，其他部分有残留液不会有这么高的响应值，柱子冲冲干净应该就没事了
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8楼2013-07-17 16:29:22
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bainaling

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by mada1986 at 2013-07-17 16:29:22
柱子不干净，其他部分有残留液不会有这么高的响应值，柱子冲冲干净应该就没事了

我想说我有的时候都要冲两个多小时呢、、、平衡柱子都是保持吸光度波动在1之内，还是有如上结果肿么破、、、
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9楼2013-07-17 16:32:14
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mada1986

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
bainaling: 金币+1 2013-07-19 12:29:11
引用回帖:
9楼: Originally posted by bainaling at 2013-07-17 16:32:14
我想说我有的时候都要冲两个多小时呢、、、平衡柱子都是保持吸光度波动在1之内，还是有如上结果肿么破、、、...

用梯度反复冲洗，用单一浓度的冲洗效果不好，如果可以的话，你把柱子型号，洗脱条件发上来，大家研究一下
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10楼2013-07-17 16:35:25
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