应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE总是做不出来，求高手指点，急急急！！！
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 1668  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

刘小皮爱喝奶

新虫 (初入文坛)

[求助] DGGE总是做不出来，求高手指点，急急急！！！

已经做了三次DGGE了，每次都是这样，真心不知道是什么原因，高手帮帮忙！！！
提取石油污染土壤总DNA，细菌通用引物Pcr扩增条带250bp左右，用的是8%的胶，梯度是40%和70%，80V跑了14h，请各位高手指点，问题到底出在哪？
DGGE总是做不出来，求高手指点，急急急！！！
2013-7-17 DGGE_副本.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-17 17:46:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小皮爱喝奶

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mirror3895 at 2013-07-18 08:53:21
提取的总DNA质量怎么样？你是扩的V3区吗？引物5'端加GC夹了吗？扩增目的片段时PCR产物质量好不好？如楼上所说，这些只是前面可能会遇到的问题，还有很多其他影响因素。建议你把你的详细步骤说一下，才好帮助你的。

我用的是美国MPBIO进口土壤DNA提取试剂盒提取的石油污染土壤总DNA，第一张是DNA跑胶图片（15000的Marker），第二张是Pcr产物跑胶图片（用的是2000的Marker，但我比对了一下，200~250bp左右），引物用的是
357F-GC-clamp        5‘-CGC CCG CCG CGC CCC GCG CCC GGC CCG CCG CCC CCG CCC CCC TAC GGG AGG CAG CAG        
518R                 ATT ACC GCG GCT GCT GG       
麻烦各位再帮我看看。。。
赞一下 回复此楼
6楼2013-07-18 15:01:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

枫叶丹

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
刘小皮爱喝奶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-18 17:47:50
这个要从PCR看起，有时候要从提DNA看起，可能存在的问题很多，不好说
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-18 08:29:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
刘小皮爱喝奶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-18 17:48:07
提取的总DNA质量怎么样？你是扩的V3区吗？引物5'端加GC夹了吗？扩增目的片段时PCR产物质量好不好？如楼上所说，这些只是前面可能会遇到的问题，还有很多其他影响因素。建议你把你的详细步骤说一下，才好帮助你的。
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-18 08:53:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶上都没条带，应该是前期PCR的问题~
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-18 11:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂推荐 +4 小聂爱学习 2026-04-14 4/200 2026-04-14 20:54 by fqwang
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +41 xaw. 2026-04-11 42/2100 2026-04-14 20:05 by honglizhao
[考研] 求助调剂，跨调 +18 X十甫寸Y 2026-04-11 19/950 2026-04-14 19:26 by Art1977
[考研] 302分求调剂 +10 凡语祈愿 2026-04-08 11/550 2026-04-14 16:50 by jiangguiquan11
[考研] 071000生物学调剂求助 +18 zzzzwww 2026-04-09 21/1050 2026-04-14 15:39 by zs92450
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[考研] 考研求调剂 +6 ban班小七 2026-04-11 6/300 2026-04-14 14:06 by 哆啦A梦只是个梦
[考研] 机械还有还有名额吗？太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 求调剂 +3 我爱高数高数爱� 2026-04-12 3/150 2026-04-14 01:00 by 王珺璞
[考研] 求调剂 +12 璃茉一定上岸 2026-04-10 13/650 2026-04-14 00:08 by Equinoxhua
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 机械专硕270求调剂，接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 346，工科求调剂 +3 moser233 2026-04-09 3/150 2026-04-11 10:04 by zhq0425
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385，求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭