应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE总是做不出来，求高手指点，急急急！！！
51/1返回列表
查看: 1662  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

刘小皮爱喝奶

新虫 (初入文坛)

[求助] DGGE总是做不出来，求高手指点，急急急！！！

已经做了三次DGGE了，每次都是这样，真心不知道是什么原因，高手帮帮忙！！！
提取石油污染土壤总DNA，细菌通用引物Pcr扩增条带250bp左右，用的是8%的胶，梯度是40%和70%，80V跑了14h，请各位高手指点，问题到底出在哪？
DGGE总是做不出来，求高手指点，急急急！！！
2013-7-17 DGGE_副本.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-17 17:46:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶上都没条带，应该是前期PCR的问题~
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-18 11:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

枫叶丹

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
刘小皮爱喝奶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-18 17:47:50
这个要从PCR看起，有时候要从提DNA看起，可能存在的问题很多，不好说
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-18 08:29:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
刘小皮爱喝奶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-07-18 17:48:07
提取的总DNA质量怎么样？你是扩的V3区吗？引物5'端加GC夹了吗？扩增目的片段时PCR产物质量好不好？如楼上所说，这些只是前面可能会遇到的问题，还有很多其他影响因素。建议你把你的详细步骤说一下，才好帮助你的。
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-18 08:53:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小皮爱喝奶

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 枫叶丹 at 2013-07-18 08:29:35
这个要从PCR看起，有时候要从提DNA看起，可能存在的问题很多，不好说

我用的是美国MPBIO进口土壤DNA提取试剂盒提取的石油污染土壤总DNA，第一张是DNA跑胶图片（15000的Marker），第二张是Pcr产物跑胶图片（用的是2000的Marker，但我比对了一下，200~250bp左右），引物用的是
357F-GC-clamp        5‘-CGC CCG CCG CGC CCC GCG CCC GGC CCG CCG CCC CCG CCC CCC TAC GGG AGG CAG CAG        
518R                 ATT ACC GCG GCT GCT GG       
麻烦各位再帮我看看。。。
赞一下 回复此楼
5楼2013-07-18 15:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +3 VvvvL 2026-04-10 3/150 2026-04-11 15:32 by xiangxu
[考研] 求调剂 +10 璃茉一定上岸 2026-04-10 10/500 2026-04-11 13:31 by 1005715100
[考研] 300分求调剂 （085501机械专硕，本科扬大） +8 xu@841019 2026-04-11 8/400 2026-04-11 10:46 by qingpingzhu
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 一志愿东北大学控制工程085406数二英二385，求调剂 +8 Ezra_Zhang 2026-04-09 8/400 2026-04-11 09:15 by 猪会飞
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 266求调剂 +29 阳阳哇塞 2026-04-07 29/1450 2026-04-10 16:20 by 高维春
[考研] 调剂申请086000一志愿西北农林科技大学生物与医药320分-本科齐鲁工业大学 +3 美美女士 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:31 by liuhuiying09
[考研] 277求调剂 +19 倪建设 2026-04-06 19/950 2026-04-10 09:24 by guosr9609
[考研] 生物与医药273求调剂 +18 荔题南墙 2026-04-05 19/950 2026-04-10 08:14 by kangsm
[考研] 生物医药调剂｜SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
[考研] 0854电子信息319求调剂（接受跨专业调剂） +5 星星不眨眼喽 2026-04-05 6/300 2026-04-07 22:16 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 338求调剂 +5 小猪红色 678 2026-04-06 6/300 2026-04-07 21:18 by 乔哒哒哒
[考研] 312求调剂 +18 gtw1 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 18:16 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 生物调剂 +5 橙子橙子橙子啊 2026-04-05 9/450 2026-04-07 15:31 by 上岸快快
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭