24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1664  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

刘小皮爱喝奶

新虫 (初入文坛)

[求助] DGGE总是做不出来,求高手指点,急急急!!!

已经做了三次DGGE了,每次都是这样,真心不知道是什么原因,高手帮帮忙!!!
提取石油污染土壤总DNA,细菌通用引物Pcr扩增条带250bp左右,用的是8%的胶,梯度是40%和70%,80V跑了14h,请各位高手指点,问题到底出在哪?
DGGE总是做不出来,求高手指点,急急急!!!
2013-7-17 DGGE_副本.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小皮爱喝奶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 枫叶丹 at 2013-07-18 08:29:35
这个要从PCR看起,有时候要从提DNA看起,可能存在的问题很多,不好说

我用的是美国MPBIO进口土壤DNA提取试剂盒提取的石油污染土壤总DNA,第一张是DNA跑胶图片(15000的Marker),第二张是Pcr产物跑胶图片(用的是2000的Marker,但我比对了一下,200~250bp左右),引物用的是
357F-GC-clamp        5‘-CGC CCG CCG CGC CCC GCG CCC GGC CCG CCG CCC CCG CCC CCC TAC GGG AGG CAG CAG        
518R                 ATT ACC GCG GCT GCT GG       
麻烦各位再帮我看看。。。
5楼2013-07-18 15:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

枫叶丹

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
刘小皮爱喝奶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-18 17:47:50
这个要从PCR看起,有时候要从提DNA看起,可能存在的问题很多,不好说
2楼2013-07-18 08:29:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
刘小皮爱喝奶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-18 17:48:07
提取的总DNA质量怎么样?你是扩的V3区吗?引物5'端加GC夹了吗?扩增目的片段时PCR产物质量好不好?如楼上所说,这些只是前面可能会遇到的问题,还有很多其他影响因素。建议你把你的详细步骤说一下,才好帮助你的。
3楼2013-07-18 08:53:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
胶上都没条带,应该是前期PCR的问题~
4楼2013-07-18 11:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +5 关忆北. 2026-04-11 5/250 2026-04-11 21:21 by lbsjt
[考研] 电子信息279求调剂,有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 290调剂生物0860 +17 哇哈哈,。 2026-04-11 19/950 2026-04-11 20:20 by dongdian1
[考研] 305求调剂 +5 77Qi 2026-04-07 5/250 2026-04-11 11:45 by zhq0425
[考研] 生物学调剂 可调剂到生物与医药 +8 李政莹 2026-04-06 9/450 2026-04-11 10:36 by wwj2530616
[考研] 调剂 +19 小张ZA 2026-04-10 20/1000 2026-04-10 22:08 by 猪会飞
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 22408 366分,本科211,一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 生物与医药调剂 +5 十七sa 2026-04-05 5/250 2026-04-10 08:14 by kangsm
[考研] 求调剂 +15 张zic 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:12 by kangsm
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +15 a1708 2026-04-06 15/750 2026-04-08 16:23 by luoyongfeng
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +10 vants 2026-04-05 11/550 2026-04-08 16:02 by screening
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 所念及所望 2026-04-06 3/150 2026-04-06 17:30 by 土木硕士招生
[考研] 285求调剂 +5 mapmath 2026-04-06 6/300 2026-04-06 17:18 by 蓝云思雨
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
[考研] 315求调剂 +5 &123456789 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:55 by nepu_uu
信息提示
请填处理意见