24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1666  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

刘小皮爱喝奶

新虫 (初入文坛)

[求助] DGGE总是做不出来,求高手指点,急急急!!!

已经做了三次DGGE了,每次都是这样,真心不知道是什么原因,高手帮帮忙!!!
提取石油污染土壤总DNA,细菌通用引物Pcr扩增条带250bp左右,用的是8%的胶,梯度是40%和70%,80V跑了14h,请各位高手指点,问题到底出在哪?
DGGE总是做不出来,求高手指点,急急急!!!
2013-7-17 DGGE_副本.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小皮爱喝奶

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 枫叶丹 at 2013-07-18 08:29:35
这个要从PCR看起,有时候要从提DNA看起,可能存在的问题很多,不好说

我用的是美国MPBIO进口土壤DNA提取试剂盒提取的石油污染土壤总DNA,第一张是DNA跑胶图片(15000的Marker),第二张是Pcr产物跑胶图片(用的是2000的Marker,但我比对了一下,200~250bp左右),引物用的是
357F-GC-clamp        5‘-CGC CCG CCG CGC CCC GCG CCC GGC CCG CCG CCC CCG CCC CCC TAC GGG AGG CAG CAG        
518R                 ATT ACC GCG GCT GCT GG       
麻烦各位再帮我看看。。。
5楼2013-07-18 15:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

枫叶丹

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
刘小皮爱喝奶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-18 17:47:50
这个要从PCR看起,有时候要从提DNA看起,可能存在的问题很多,不好说
2楼2013-07-18 08:29:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
刘小皮爱喝奶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-07-18 17:48:07
提取的总DNA质量怎么样?你是扩的V3区吗?引物5'端加GC夹了吗?扩增目的片段时PCR产物质量好不好?如楼上所说,这些只是前面可能会遇到的问题,还有很多其他影响因素。建议你把你的详细步骤说一下,才好帮助你的。
3楼2013-07-18 08:53:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
胶上都没条带,应该是前期PCR的问题~
4楼2013-07-18 11:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-11 7/350 2026-04-11 23:48 by baobaoye
[考研] 290求调剂 +13 luoziheng 2026-04-10 13/650 2026-04-11 23:15 by labixiaoqiao
[考研] 0860004 求调剂 309分 +9 Yin DY 2026-04-08 9/450 2026-04-11 22:55 by dongdian1
[考研] 农学0904 312求调剂 +3 Say Never 2026-04-11 3/150 2026-04-11 17:22 by daydayup2005
[考研] 299求调剂 +7 ZVVZ13 2026-04-08 7/350 2026-04-11 11:54 by zhq0425
[考研] 0859,337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +17 努力奋斗112 2026-04-06 20/1000 2026-04-11 00:31 by wangjihu
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 085404 298分求调剂 +10 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 11/550 2026-04-10 16:44 by wangy0907
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +22 土豆er? 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 10:58 by 高维春
[考研] 环境专硕调剂 +16 会说话的肘子 2026-04-06 16/800 2026-04-10 10:30 by asy1wn
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 085600材料与化工,求调剂 +11 won_qii 2026-04-07 11/550 2026-04-09 17:03 by luoyongfeng
[考研] 085400电子信息类(川大控制工程)求调剂可跨专业 求老师联系 +3 626776879 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:05 by 猪会飞
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 材料与化工专硕306分找合适调剂 +27 沧海轻舟e 2026-04-06 28/1400 2026-04-08 22:06 by wdyheheeh
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
信息提示
请填处理意见