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chxiuagoing

新虫 (初入文坛)

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在线: 6.9小时
虫号: 1926408
注册: 2012-08-06
专业: 蛋白质组学

[求助] 蛋白复性问题

各位高手，求助蛋白复性问题。我的蛋白是高浓度的包涵体表达，我的复性方法是先用1%TritonX-100,50mMNaCl洗涤两次，再用8M的尿素溶解，离心，加复性液：GSH:GSSG=10：1，PH=8.0的PBS,静置1h左右，离心，透析（24h）;透析结束没有发现有沉淀，酶活检测发现没有酶活，SDS-PAGE发现有目的条带。。。求指教。。。谢谢！！！！

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1楼 2013-07-11 16:14:30

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pennchem

专家顾问 (正式写手)

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注册: 2012-11-21
专业: 生物大分子结构与功能
管辖: 生物科学

【答案】应助回帖

同样的缓冲液，逐步降低尿素的浓度，（比如从在6M尿素中透析，然后4M，然后2M，依次降低）降低到0.1M左右的时候，再测酶活性

行至水穷处，坐看云起时

3楼2013-08-11 18:14:04

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