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【求助/交流】急!!!SDS-PAGE后蛋白质复性方法
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bigplantgirl
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[交流]
【求助/交流】急!!!SDS-PAGE后蛋白质复性方法
已有4人参与
最近在做SOD酶,想获得这个酶的分子量,现在我的样品中有好多杂蛋白,所以想把SDS-PAGE过后的凝胶进行蛋白质复性,再做活性染色,看对应的分子量。查到一些资料说用曲通浸泡半小时再放在复性缓冲液中过夜,不知道这个方法是否正确,还有就是复性缓冲液的配方是什么?希望高手指教!!!
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1楼
2010-06-06 08:26:17
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yangjunzju
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我OUT了,貌似没听过SDS-PAGE后的蛋白复性,求高手指点。。。
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2楼
2010-06-06 11:42:47
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bigplantgirl
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各位高手,你们在哪啊?
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3楼
2010-06-06 17:18:06
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月月大可
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我也out了
没听说过SDS后还复性的。
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4楼
2010-06-06 20:45:52
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goodwish
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楼主很牛!
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5楼
2010-06-06 20:51:29
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1楼
:
Originally posted by
bigplantgirl
at 2010-06-06 08:26:17:
最近在做SOD酶,想获得这个酶的分子量,现在我的样品中有好多杂蛋白,所以想把SDS-PAGE过后的凝胶进行蛋白质复性,再做活性染色,看对应的分子量。查到一些资料说用曲通浸泡半小时再放在复性缓冲液中过夜,不知道 ...
不知道你找到了没有,我也是做这个的,但没有得到好的结果
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Nothingcannotbedone!
6楼
2011-10-19 10:33:22
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liyvning
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亲,为什么不做非变性电泳呢,不让他变性你就可以直接活性染色了吧
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7楼
2012-12-01 21:38:16
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edoz1986
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可以用非离子型的去污剂如 triton x100 来替换掉离子型的sds 这样你的蛋白就有活性了。具体就是用5%左右的triton x100 来孵育你的sds胶,半小时换一次buffer,一共三次就够了。
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8楼
2013-05-23 09:36:45
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xulili94
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N.D. Phuong, Y.S. Jeong, T. Selvaraj, S.K. Kim, Y.H. Kim, K.H. Jung, J. Kim, H.D. Yun, S.L.
Wong, J.K. Lee, H. Kim, et al., Appl. Biochem. Biotechnol. 168 (2012) 1349–1350 Erratum in:.
可以看下这篇文献
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9楼
2018-12-26 20:14:33
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