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bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】急!!!SDS-PAGE后蛋白质复性方法 已有4人参与

最近在做SOD酶,想获得这个酶的分子量,现在我的样品中有好多杂蛋白,所以想把SDS-PAGE过后的凝胶进行蛋白质复性,再做活性染色,看对应的分子量。查到一些资料说用曲通浸泡半小时再放在复性缓冲液中过夜,不知道这个方法是否正确,还有就是复性缓冲液的配方是什么?希望高手指教!!!
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yangjunzju

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我OUT了,貌似没听过SDS-PAGE后的蛋白复性,求高手指点。。。
2楼2010-06-06 11:42:47
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bigplantgirl

铜虫 (初入文坛)

各位高手,你们在哪啊?
3楼2010-06-06 17:18:06
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月月大可

木虫 (著名写手)

我也out了
没听说过SDS后还复性的。
4楼2010-06-06 20:45:52
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

楼主很牛!
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
5楼2010-06-06 20:51:29
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314243568

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1楼: Originally posted by bigplantgirl at 2010-06-06 08:26:17:
最近在做SOD酶,想获得这个酶的分子量,现在我的样品中有好多杂蛋白,所以想把SDS-PAGE过后的凝胶进行蛋白质复性,再做活性染色,看对应的分子量。查到一些资料说用曲通浸泡半小时再放在复性缓冲液中过夜,不知道 ...

不知道你找到了没有,我也是做这个的,但没有得到好的结果
Nothingcannotbedone!
6楼2011-10-19 10:33:22
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liyvning

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
亲,为什么不做非变性电泳呢,不让他变性你就可以直接活性染色了吧
7楼2012-12-01 21:38:16
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edoz1986

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以用非离子型的去污剂如 triton x100 来替换掉离子型的sds  这样你的蛋白就有活性了。具体就是用5%左右的triton x100 来孵育你的sds胶,半小时换一次buffer,一共三次就够了。
8楼2013-05-23 09:36:45
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xulili94

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
N.D. Phuong, Y.S. Jeong, T. Selvaraj, S.K. Kim, Y.H. Kim, K.H. Jung, J. Kim, H.D. Yun, S.L.
Wong, J.K. Lee, H. Kim, et al., Appl. Biochem. Biotechnol. 168 (2012) 1349–1350 Erratum in:.
可以看下这篇文献
9楼2018-12-26 20:14:33
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