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【求助/交流】急!!!SDS-PAGE后蛋白质复性方法
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bigplantgirl
铜虫
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注册: 2010-01-19
专业: 微生物遗传育种学
[交流]
【求助/交流】急!!!SDS-PAGE后蛋白质复性方法
已有4人参与
最近在做SOD酶,想获得这个酶的分子量,现在我的样品中有好多杂蛋白,所以想把SDS-PAGE过后的凝胶进行蛋白质复性,再做活性染色,看对应的分子量。查到一些资料说用曲通浸泡半小时再放在复性缓冲液中过夜,不知道这个方法是否正确,还有就是复性缓冲液的配方是什么?希望高手指教!!!
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1楼
2010-06-06 08:26:17
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edoz1986
新虫
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性别:
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专业: 生物大分子结构与功能
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以用非离子型的去污剂如 triton x100 来替换掉离子型的sds 这样你的蛋白就有活性了。具体就是用5%左右的triton x100 来孵育你的sds胶,半小时换一次buffer,一共三次就够了。
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8楼
2013-05-23 09:36:45
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yangjunzju
木虫
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红花: 1
帖子: 780
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虫号: 827275
注册: 2009-08-13
性别: GG
专业: 生物化工与食品化工
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
我OUT了,貌似没听过SDS-PAGE后的蛋白复性,求高手指点。。。
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2楼
2010-06-06 11:42:47
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bigplantgirl
铜虫
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虫号: 945027
注册: 2010-01-19
专业: 微生物遗传育种学
各位高手,你们在哪啊?
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3楼
2010-06-06 17:18:06
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月月大可
木虫
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在线: 295.7小时
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注册: 2008-04-20
性别: GG
专业: 生物化学
我也out了
没听说过SDS后还复性的。
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4楼
2010-06-06 20:45:52
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