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jessica_nn

铜虫 (初入文坛)

[求助] 包涵体柱上复性

最近在做包涵体的溶解与复性,尝试了透析复性,可是每次透析都沉淀,想尝试一下柱上复性,希望高手指导一下!有以下问题:1.柱上复性可以在镍柱子上进行吗?对色谱柱填料有什么要求?2.具体柱上复性如何操作?需要用到哪些溶液,配方是什么?
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xissy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-26 18:42:06
具体的实验方法可以看看下面这个文献,讲的非常清楚了。包括具体的步骤、溶液的配置。Ni柱的话好像一般的就可以了。但是有个问题,复性的过程中,蛋白发生沉淀,就会堵塞柱子。因此每次纯化的包涵体浓度、梯度复性溶液的体积、速度都需要摸索。

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  • 附件 1 : 18113437ac.pdf
  • 2013-08-26 13:17:59, 185.74 K
2楼2013-08-26 13:20:53
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linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-26 18:47:31
可以尝试一下快速稀释法。
小兵一个
3楼2013-08-26 14:46:17
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晃晃飞天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xissy at 2013-08-26 13:20:53
具体的实验方法可以看看下面这个文献,讲的非常清楚了。包括具体的步骤、溶液的配置。Ni柱的话好像一般的就可以了。但是有个问题,复性的过程中,蛋白发生沉淀,就会堵塞柱子。因此每次纯化的包涵体浓度、梯度复性溶 ...

怎么下不了啊

发自小木虫Android客户端
4楼2016-07-23 16:38:29
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