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jessica_nn铜虫 (初入文坛)
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包涵体柱上复性
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| 最近在做包涵体的溶解与复性,尝试了透析复性,可是每次透析都沉淀,想尝试一下柱上复性,希望高手指导一下!有以下问题:1.柱上复性可以在镍柱子上进行吗?对色谱柱填料有什么要求?2.具体柱上复性如何操作?需要用到哪些溶液,配方是什么? |
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-26 18:42:06
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-26 18:42:06
| 具体的实验方法可以看看下面这个文献,讲的非常清楚了。包括具体的步骤、溶液的配置。Ni柱的话好像一般的就可以了。但是有个问题,复性的过程中,蛋白发生沉淀,就会堵塞柱子。因此每次纯化的包涵体浓度、梯度复性溶液的体积、速度都需要摸索。 |
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2013-08-26 13:17:59, 185.74 K
2楼2013-08-26 13:20:53
linxt2005
金虫 (小有名气)
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3楼2013-08-26 14:46:17
晃晃飞天
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