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箫箫客

银虫 (小有名气)

[求助] 大分量蛋白的SDS-PAGE

哪位大虾做过蛋白分子量为160、190的SDS-PAGE。转膜效率低,转膜后用考马斯亮蓝染胶,大分量都没转下来。听说可以在转膜液里加SDS,那是加粉末的还是加液体的,转的过程中蛋白会不会被SDS降解呢?谁做过大分子量的,帮帮忙啦
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 回答很好,perfect 2013-07-10 09:15:37
转膜液里加SDS不是后加,是配制转膜液时含有终浓度为0.0375%的SDS,用固体还是溶液随便你。SDS不会降解蛋白,只是与蛋白结合,使其表面有足够的负电荷。在电场力的作用下,可以提高迁移速度。简单的说,就是让蛋白在同样的转膜条件下转得快一些。大蛋白一般不需要考虑是否会转过,一般是增加转膜时间就可以了。
2楼2013-07-10 01:19:35
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