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dazhen9527

新虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖切胶回收基因组

因为是大片段基因组,不能用试剂盒回收,电泳后切胶回收,用酚氯仿多次抽提后,用乙醇或异丙醇沉淀基因组会出现很多的沉淀,应该是沉淀下琼脂糖了,请问大家有没有好的方法解决,小弟再次感谢了!
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justdoit
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)

没做过,围观一下
加油
2楼2013-07-05 10:20:19
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dazhen9527

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 带刺毛毛虫 at 2013-07-05 10:20:19
没做过,围观一下

各位大神们快现身吧
justdoit
3楼2013-07-05 17:05:02
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waterstill

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-07 17:47:33
你确定沉淀下的是琼脂糖?一般这个沉淀是蛋白质。

你的描述太简单,需要进一步说明(1)你做的是什么物种的基因组,这个很重要?(2)细胞是什么状态,生长了多长时间?(3)你提取基因组的方法步骤?
4楼2013-07-07 06:31:53
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dazhen9527

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by waterstill at 2013-07-07 06:31:53
你确定沉淀下的是琼脂糖?一般这个沉淀是蛋白质。

你的描述太简单,需要进一步说明(1)你做的是什么物种的基因组,这个很重要?(2)细胞是什么状态,生长了多长时间?(3)你提取基因组的方法步骤?

我提的是细菌的基因组,用的酚仿抽提大方法,提好后担心有质粒污染,再跑琼脂糖电泳,切胶回收,用异丙醇或者乙醇沉淀,那么多沉淀应该是琼脂糖啊?您有好的办法吗,谢谢!
justdoit
5楼2013-07-07 13:02:56
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pepsi可乐

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有专门的pcr纯化试剂盒,不是胶回收的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2013-07-07 20:59:25
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zhouking8758

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by dazhen9527 at 2013-07-07 13:02:56
我提的是细菌的基因组,用的酚仿抽提大方法,提好后担心有质粒污染,再跑琼脂糖电泳,切胶回收,用异丙醇或者乙醇沉淀,那么多沉淀应该是琼脂糖啊?您有好的办法吗,谢谢!...

你切胶后怎么回收的?用什么溶的胶?
7楼2013-07-07 21:45:09
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dazhen9527: 金币+3, 有帮助 2013-07-08 08:21:52
dazhen9527: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2013-07-16 09:52:26
以前见别人做这个是用电洗脱或玻璃奶回收试剂盒。楼主是用低熔点琼脂糖?
为什么
8楼2013-07-07 21:52:25
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dazhen9527

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by pepsi可乐 at 2013-07-07 20:59:25
有专门的pcr纯化试剂盒,不是胶回收的

谢谢您的回复,回收试剂盒不能回收大片段基因组
justdoit
9楼2013-07-08 08:20:44
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dazhen9527

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 547star at 2013-07-07 21:52:25
以前见别人做这个是用电洗脱或玻璃奶回收试剂盒。楼主是用低熔点琼脂糖?

正打算试试电洗脱,谢谢!
justdoit
10楼2013-07-08 08:22:17
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