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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖切胶回收基因组
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dazhen9527

新虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖切胶回收基因组

因为是大片段基因组，不能用试剂盒回收，电泳后切胶回收，用酚氯仿多次抽提后，用乙醇或异丙醇沉淀基因组会出现很多的沉淀，应该是沉淀下琼脂糖了，请问大家有没有好的方法解决，小弟再次感谢了！
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justdoit
1楼 2013-07-04 18:24:56
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带刺毛毛虫

银虫 (小有名气)
没做过，围观一下
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加油
2楼2013-07-05 10:20:19
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dazhen9527

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 带刺毛毛虫 at 2013-07-05 10:20:19
没做过，围观一下

各位大神们快现身吧
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justdoit
3楼2013-07-05 17:05:02
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waterstill

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-07-07 17:47:33
你确定沉淀下的是琼脂糖？一般这个沉淀是蛋白质。

你的描述太简单，需要进一步说明（1）你做的是什么物种的基因组，这个很重要？（2）细胞是什么状态，生长了多长时间？（3）你提取基因组的方法步骤？
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4楼2013-07-07 06:31:53
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dazhen9527

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by waterstill at 2013-07-07 06:31:53
你确定沉淀下的是琼脂糖？一般这个沉淀是蛋白质。

你的描述太简单，需要进一步说明（1）你做的是什么物种的基因组，这个很重要？（2）细胞是什么状态，生长了多长时间？（3）你提取基因组的方法步骤？

我提的是细菌的基因组，用的酚仿抽提大方法，提好后担心有质粒污染，再跑琼脂糖电泳，切胶回收，用异丙醇或者乙醇沉淀，那么多沉淀应该是琼脂糖啊？您有好的办法吗，谢谢！
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justdoit
5楼2013-07-07 13:02:56
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pepsi可乐

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有专门的pcr纯化试剂盒，不是胶回收的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2013-07-07 20:59:25
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zhouking8758

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dazhen9527 at 2013-07-07 13:02:56
我提的是细菌的基因组，用的酚仿抽提大方法，提好后担心有质粒污染，再跑琼脂糖电泳，切胶回收，用异丙醇或者乙醇沉淀，那么多沉淀应该是琼脂糖啊？您有好的办法吗，谢谢！...

你切胶后怎么回收的？用什么溶的胶？
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7楼2013-07-07 21:45:09
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dazhen9527: 金币+3, ★有帮助 2013-07-08 08:21:52
dazhen9527: 金币+5, ★有帮助, 谢谢 2013-07-16 09:52:26
以前见别人做这个是用电洗脱或玻璃奶回收试剂盒。楼主是用低熔点琼脂糖？
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为什么
8楼2013-07-07 21:52:25
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dazhen9527

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by pepsi可乐 at 2013-07-07 20:59:25
有专门的pcr纯化试剂盒，不是胶回收的

谢谢您的回复，回收试剂盒不能回收大片段基因组
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justdoit
9楼2013-07-08 08:20:44
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dazhen9527

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 547star at 2013-07-07 21:52:25
以前见别人做这个是用电洗脱或玻璃奶回收试剂盒。楼主是用低熔点琼脂糖？

正打算试试电洗脱，谢谢！
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justdoit
10楼2013-07-08 08:22:17
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