应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌染色体插入位点
71/1返回列表
查看: 2033  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xikexiao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-07-04 15:29:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-05 09:22:20
如果要做表达，没有启动子的话表达水平会很低，一般是加强组成型启动子或者诱导启动子。插入位点应该选取不影响宿主的正常生长代谢的位置。一般可以通过同源重组的方式插入。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-07-05 08:36:53
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gywyl1977

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-05 09:22:25
xikexiao: 金币+4 2013-07-05 22:55:13
如果是想看这个基因的表达在大肠中的功能，建议先用质粒携带表达，当然肯定要加启动子的。毕竟质粒表达简单些。如果有表型，再整合到染色体上表达。整合时先找个位点，构建好同源臂，同源臂中间加启动子和你要表达的基因，然后通过同源重组将启动子和基因整合到染色体。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-07-05 09:20:03
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xikexiao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2013-07-05 14:30:36
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
xikexiao: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-05 22:55:02
引用回帖:
4楼: Originally posted by xikexiao at 2013-07-05 14:30:36
谢谢～受教了。整合的时候是将目的基因和抗生素基因连在一起电转入受体细胞，还是有什么别的方法？...

把目的基因和抗性基因放在两个同源臂直接，一起整合到染色体上。转化可以用电转化，也可以用熱激转化。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-07-05 16:11:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-05 16:11:51
把目的基因和抗性基因放在两个同源臂直接，一起整合到染色体上。转化可以用电转化，也可以用熱激转化。...

其他表达阅读框呢？RBS,RNA聚合酶等应该一起加进去吧？



电转化效率目前是否是最常用最有效的？

另外，选取的启动子是否在异源就有作用呢
赞一下 回复此楼
6楼2015-03-11 10:12:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengjunchen

铜虫 (小有名气)
挖个坟……不知楼主后来表达体系搞定了没有？最近我也想在大肠杆菌里插个基因表达蛋白，不过不知道选什么整合型质粒好？选择哪个插入位点的表达量会高一些呢？
赞一下 回复此楼
7楼2015-07-23 10:54:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xikexiao 的主题更新
71/1返回列表
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学070300 求调剂 +12 哈哈哈^_^ 2026-04-12 12/600 2026-04-12 22:08 by 独醉梦孤城
[考研] 085600材料与化工，求调剂 +12 won_qii 2026-04-07 12/600 2026-04-12 17:02 by lhj2009
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[考研] 一志愿华中农微生物，288分，三年实验经历 +11 代fish 2026-04-09 11/550 2026-04-12 10:21 by Hayaay
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-06 10/500 2026-04-11 10:36 by 紫曦紫棋
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 284求调剂 +19 梵@@ 2026-04-06 21/1050 2026-04-10 21:12 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂288 +6 ioodiiij 2026-04-10 8/400 2026-04-10 21:07 by zhouxiaoyu
[考研] 22408 366分，本科211，一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 314求调剂 +23 wakeluofu 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 15:31 by MOF_Catal
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 材料专硕调剂 +16 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 17/850 2026-04-09 21:16 by wutongshun
[考研] 考研调剂 +13 冰冰，，， 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +15 a1708 2026-04-06 15/750 2026-04-08 16:23 by luoyongfeng
[考研] 专硕085403，291分，有两篇专利，一国一奖 +3 哈吉咪哈吉咪 2026-04-07 3/150 2026-04-07 18:21 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭