24小时热门版块排行榜

返回列表

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

[交流] Western Blotting在怎样的环境温度下做结果比较好？

正要学做WB，有人说如果实验室没有空调，这个天太热，效果不好。还有人说天热做效果更好。
我没有实际做过WB，猜测他们说的在WB的不同步骤适合在不同温度下进行。
求教各位高手，温度对WB的影响，并恳请各位高手点拨WB成败的关键点和注意事项，谢谢！！！

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

求助Western Blot实验条带没出现的原因分析及解决办法已经有7人回复
请教为什Western Blot一定要用两种抗体？已经有8人回复
western blot出现多条带是什么原因已经有8人回复
请大家帮我看一下我的western blot的图已经有12人回复
细胞提蛋白做western blot 已经有9人回复
请问用Western做co-ip，内参要如何设置，内参是必须的吗？已经有3人回复
环境模拟——室内水环境温度模拟已经有5人回复
western blotting 显影曝光结果不理想，求高手指点已经有15人回复
western blot 的蛋白上样量已经有8人回复
小分子蛋白的western blotting注意事项已经有12人回复
western blot没有结果是怎么回事~~ 已经有12人回复
Western Blot结果条带中间不见了，请教高手！已经有13人回复
细胞提取蛋白，做western blotting，怎么知道是提取总蛋白还是膜蛋白呢？已经有4人回复
western blot 出不来结果！！！已经有17人回复
Western Blot的问题（关于重复性和显色）已经有11人回复
western blot 背景深浅问题，请大家指教下啊已经有6人回复
Western Blot抗体选择已经有8人回复
【求助/交流】求一个western blotting一抗二抗孵育的好方法？已经有9人回复
【求助/交流】western blotting 已经有9人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2013-06-18 12:00:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zhaoxr0311

新虫 (小有名气)

应助: 18 (小学生)
金币: 343.3
帖子: 53
在线: 23.7小时
虫号: 2485691

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小毛孩24: 金币+2 2013-06-20 09:06:10

凝胶是越热凝的越快，但肯定不是好事，跑胶的时候因为有电流自己会产热，小蛋白不怎么受影响，如果大蛋白最好放4°跑，温度常温就可以，25℃吧

赞一下

回复此楼

2楼2013-06-18 14:45:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

BioEPI: 4
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小毛孩24: 金币+5 2013-06-20 09:06:17

如果你指狭隘的WB，抗体孵育一般是在室温下进行的。温度较高时结合速度比较快。
如果你指从提取样品、跑胶、转膜都算是的话，当然有些步骤最好在低温下进行。比方说你的样品做超声一般是在冰浴条件下的。跑胶的速度快时会产生大量的热，最好用恒温水浴或者是低温层析柜里进行。湿法转膜时的电流比较大，也最好在低温下进行。

赞一下

回复此楼

3楼2013-06-19 04:11:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖