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lumingyang金虫 (初入文坛)
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[求助]
求助：大豆基因组3000bpDNA扩增，P不出来
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大豆基因组DNA，欲扩增3K目标基因，先拿Taq试PCR温度和其他条件，拿别人设计的目标产物是1K左右的引物作为对照，55-62度梯度PCR。结果是5的温度梯度对照（1K）都P出来了，我的三对引物都木有P出来。20的体系：10umol的左右引物各5，模板2，dNTP 2， Taq 0.2 ，Buffer 2， ddH2O 13.4. PCR：94 4min; 94 30sec, 60 30sec, 72 3min, 35cycles; 72 10min; 25 forever.求大神分析接下来该怎么改进，怎么才能P出来 梯度PCR-5.5.jpg |
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