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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达蛋白的菌株超声的问题
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liuxiuaza

金虫 (正式写手)

[求助] 表达蛋白的菌株超声的问题

要做蛋白纯化 ，对诱导表达的菌株进行超声裂解，可是离心后，上清很浑浊，不知道是什么原因？还请各位多多指教。
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1楼2013-06-05 20:08:35
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qianshengguo

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liuxiuaza: 金币+1 2013-06-09 17:02:02
可能原因：
1.可溶性的杂蛋白本身的特性：非常容易溶解。
2.超声时，蛋白有部分变性，成为肉眼几不可见絮状物。
3.裂解后的菌液浓度大或粘稠度较高导致传质阻力大，杂蛋白在离心情况下向下沉降速度非常慢，在设定的时间内来不及沉到管底。
建议现在超高速离心，应该可以离下去。
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3楼2013-06-08 14:23:45
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liuxiuaza: 金币+1 2013-06-06 13:46:35
建议超声时不要把超声头放得太高或太低，放到中间不会起泡沫，不会让蛋白变性，
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星陈代谢
2楼2013-06-06 08:50:44
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
liuxiuaza: 金币+1 2013-06-09 17:01:57
离心机不行， 16000 g/rpm以上离心。
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4楼2013-06-09 17:00:47
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