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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liuxiuaza

金虫 (正式写手)

[求助] 表达蛋白的菌株超声的问题

要做蛋白纯化 ,对诱导表达的菌株进行超声裂解,可是离心后,上清很浑浊,不知道是什么原因?还请各位多多指教。
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

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感谢参与,应助指数 +1
liuxiuaza: 金币+1 2013-06-06 13:46:35
建议超声时不要把超声头放得太高或太低,放到中间不会起泡沫,不会让蛋白变性,
星陈代谢
2楼2013-06-06 08:50:44
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qianshengguo

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
liuxiuaza: 金币+1 2013-06-09 17:02:02
可能原因:
1.可溶性的杂蛋白本身的特性:非常容易溶解。
2.超声时,蛋白有部分变性,成为肉眼几不可见絮状物。
3.裂解后的菌液浓度大或粘稠度较高导致传质阻力大,杂蛋白在离心情况下向下沉降速度非常慢,在设定的时间内来不及沉到管底。
建议现在超高速离心,应该可以离下去。
3楼2013-06-08 14:23:45
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


liuxiuaza: 金币+1 2013-06-09 17:01:57
离心机不行, 16000 g/rpm以上离心。
4楼2013-06-09 17:00:47
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