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皇猪

木虫 (正式写手)

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[求助] PCR结果出现弥散现象

各位道友：
最近我做ITS序列标记实验，PCR结果如下图所示，在成像结果中可以看到弥散现象，这是怎么一回事？？？

对于这个问题，我做了引物梯度实验、DNA模板梯度实验，结果还是一样，
模板DNA的A260/A280比值为1.89,纯度还可以，求研友帮忙分析下，是什么原因造成弥散现象的！！！

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没有梦想，那跟咸鱼有什么分别

1楼 2013-06-03 19:32:28

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引用回帖:

4楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-04 13:50:08
但从这张图来看，以我以前碰到的情况，一是模板浓度太高，二是模板不纯，有杂蛋白污染，三是电泳缓冲液不新鲜，不过你说模板纯度好而且做过模板浓度梯度，这就奇怪了，是否你的模板没有足够稀释呢，这种情况应该与引 ...

模板是分管稀释的，保存母板，稀释应该没问题，电泳缓冲液我特意新换了一下，应该也没什么问题，纠结。