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lxyconan

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量相关问题

1、探针离上游引物距离很远,离下游引物距离很近,对反应影响大不大?退火时间长一点是不是可以解决?(产物216bp)
2、某个引物会把探针当成引物 合成产物么?我跑胶的时候有非特异条带,分子量和探针引物的产物差不多,小于我的目标序列。但是只有引物的时候,跑胶的时候没有这种条带。
3、如果磷酸化,探针的5’  和3’是不是都可以磷酸化?这样就可以防止引物与探针产生非目的条带。
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