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wei_suzhen

新虫 (小有名气)

[求助] 酶比活力相关的公式

先在测定管中加入200μL三聚氰胺基质液,37℃，30min后为什么在对照管加入200μL三聚氰胺基质液？
"准管吸光度－空白管吸光度 "得到的是什么？
1500μmol/L是如何得到的？

       为什么由这个公式就能得到酶的比活力                                    
                                              测定管吸光度－对照管吸光度   1500μmol/L
“三聚氰胺脱氨酶比活力 /(U/L )= ——————————————×—————”
                               标准管吸光度－空白管吸光度    30min
酶比活力相关的公式
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酶比活力相关的公式-1
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1楼 2013-05-26 19:44:03
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

兰馨菜菜

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2013-06-08 20:27:34
、在特定条件下，单位重量（mg）蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。 　　2、比活力(性)(Specific Activity)是酶纯度的量度,即指:单位重量的蛋白质中所具有酶的活力单位数,一般用IU/mg蛋白质来表示.一 般来说,酶的比活力越高,酶越纯.。 　　3、比活力 为每毫克蛋白质所具有的酶活力单位数，一般用酶活力单位/mg蛋白质表示。酶的比活力在酶学研究中用来衡量酶的纯度，对于同一种酶来说，比活力越大，酶的纯度越高。利用比活力的大小可以用来比较酶制剂中单位质量蛋白质的催化能力，是表示酶的纯度高低的一个重要指标。
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6楼2013-06-08 13:47:25
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小蒋

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wei_suzhen: 金币+5, ★有帮助 2013-05-27 18:50:57
先在测定管中加入200μL三聚氰胺基质液,37℃，30min后在对照管加入200μL三聚氰胺基质液，是为了得到酶解后吸光度值，和没有酶解前的的吸光度，这样就得到了测定值和测定值的背景吸光度，两者的差值就是吸光度的变化值，标准管吸光度－空白管吸光度得到是相当于酶活总量，1500μmol/L是标准管30min能释放的氨的量。
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我想我会的。
2楼2013-05-27 14:56:48
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hanziNUST

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wei_suzhen at 2013-06-08 22:07:50
但是对照管也有酶反应吧...

在计算时已经扣除了可能由于这一过程酶反应产生的氨了（测定管吸光度－对照管吸光度）；计算酶活仅是用30min内产生的氨量进行计算的
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9楼2013-06-09 10:54:19
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普通回帖

wei_suzhen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小蒋 at 2013-05-27 14:56:48
先在测定管中加入200μL三聚氰胺基质液,37℃，30min后在对照管加入200μL三聚氰胺基质液，是为了得到酶解后吸光度值，和没有酶解前的的吸光度，这样就得到了测定值和测定值的背景吸光度，两者的差值就是吸光度的变化 ...

先在测定管中加入200μL三聚氰胺基质液,37℃，30min，但此时被没有终止酶反应，又在对照管加入200μL三聚氰胺基质液；然后混匀, 置 37 ℃水浴
40 m in,再测定吸光度；这不对照管也有酶解反应呀？
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3楼2013-05-27 18:50:46
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wcj668899

至尊木虫 (文坛精英)

教师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wei_suzhen: 金币+5, ★有帮助 2013-06-08 22:08:46
‘这不对照管也有酶解反应呀？’
对照管是37℃，30min后才加的三基氰胺基质液，---加完后就看作马上同测定管同时测定，然后再计算差值，两者的差值就是吸光度的变化值。30分钟前，对照管没有酶解反应，而测定管有酶解反应吧。这就造成了酶解反应物的吸光度的差。
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抓紧努力，狠抓重点，省时高效，再创辉煌。
4楼2013-06-08 07:20:15
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hanziNUST

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by wei_suzhen at 2013-05-27 18:50:46
先在测定管中加入200μL三聚氰胺基质液,37℃，30min，但此时被没有终止酶反应，又在对照管加入200μL三聚氰胺基质液；然后混匀, 置 37 ℃水浴
40 m in,再测定吸光度；这不对照管也有酶解反应呀？...

这后40min反应应该是测定氨的显色反应
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5楼2013-06-08 07:47:52
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wei_suzhen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hanziNUST at 2013-06-08 07:47:52
这后40min反应应该是测定氨的显色反应...

但是对照管也有酶反应吧
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7楼2013-06-08 22:07:50
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wei_suzhen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wcj668899 at 2013-06-08 07:20:15
‘这不对照管也有酶解反应呀？’
对照管是37℃，30min后才加的三基氰胺基质液，---加完后就看作马上同测定管同时测定，然后再计算差值，两者的差值就是吸光度的变化值。30分钟前，对照管没有酶解反应，而测定管有酶 ...

37度水浴30min酶应该没失活吧，在后40min，37度水浴中，对照管应该有没反应吧
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8楼2013-06-08 22:13:16
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wei_suzhen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hanziNUST at 2013-06-09 10:54:19
在计算时已经扣除了可能由于这一过程酶反应产生的氨了（测定管吸光度－对照管吸光度）；计算酶活仅是用30min内产生的氨量进行计算的...

标准管吸光度－空白管吸光度 "得到的是什么？
1500μmol/L是如何得到的？
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10楼2013-06-09 20:53:50
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