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小果冻524

新虫 (小有名气)

[求助] DGGE 切胶溶胶问题

以前一直做DGGE,切胶后也不捣碎,直接加30ul水溶了立即做PCR,效果都很好;但是从三月底开始切胶后一直做不出PCR,有时候能出来也有很多拖尾,一直到现在我试了琼脂糖胶的试剂盒回收,试了捣碎煮沸和水浴各种方法,都不理想,都两个月了切胶一直不能溶不出模板来,我都快崩溃了,不知道问题到底出现在哪里!!用的GELRED染色,梯度35%-65%,扩增长度400多不到500bp,以前超好的我都没想到过溶胶也会容不出来的,现在收到了巨大的打击!!请大家帮我分析下吧!感谢感谢!!
DGGE 切胶溶胶问题
3.15.jpg  这个是以前做的好的时候的溶胶后PCR图


DGGE 切胶溶胶问题-1
4.10.jpg 这个就是后来的差的
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liugs

禁虫 (正式写手)

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6楼2013-05-21 07:59:36
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