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sunshinewood铁杆木虫 (小有名气)
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[求助]
基因真核表达
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本人需要做基因真核表达，但是作为初学者，要扩增已知基因序列，苦于找不到合适的引物，故请群群里的高手给予指导，不胜感激。 已知基因序列如下： 信号肽序列：ATGAAATTCTTAGTCAACGTTGCCCTTGTTTTTATGGTCGTATACATTTCTTACATCTATGCGGATCGAT 目的基因开放阅读框ORF：atgttggggaagtcactgtttttagtgaccattttgtttgcactgtgtagtgca aatttgtttcattctggtaattatgtgtactactatcaaagtgcttttagaccaccaaatggatggcatttgcaagggggtgcttatgcagtagtgaattctactactaaatataataatgcaggcgccgctagtgagtgttctgtaggtgttctttttaattatactaacggaaacgacgttggttataataatagtgcttcttctatagccatgacagcaccgttgtctggtatgtcttggtctaaagcagaattttgtactgcccactgtaacttctcggattttacagtgtttgttacacattgttttgcaaattcttgtcctttaacaggtaggatagagcagaaccatattcgtatttctgcaatgaaaaatggttctttattttataatttaacagttagcgtatctaaatactctagatttaaatcgtttcaatgtgttaacaatttcacttctgtttatttaaatggtgatcttgtttttacttctaacgaaaccactgatgttacaggtgctggtgtgtattttaaagcaggtgggcctataacctacaaaattatgaaagaatttaaggttttggcttattttgtaaatggcactgcgcaagatgtaattttgtgtgatgatacacctagaggcttgcttgcgtgtcaatataatactggtaattttacggatggtttttatccatttactaacagtagttcagttaaggaaagatttattgtgtaccgtgaaagtagtgttaatactactttggcgttaactaactttacttttcataatgagactaatgcacaacctaattctctaggtggtgttcagtctattcaaacttatcaaacacaaacagctcagagtggctattataattttaatttatcatttctgagtagttttgtgtatagagagtctaattacatgtatgggtcttaccaccgtgcatgtaatttagattagaaactattaataatggcttgtggtttaattcactgtcagtttcgcttgcatatggaccacttcaaggtgggtgtaagcagtcggtctttagtggtagagccacttgttgttatgcctattcatataatggccctcgcgcttgtaaaggtgtttacgggggtgagttgtcacaaagttttgaatgtggtttgttggtttttgttactaagagcgatggttctcgtatacaaacagccaccaatccaccagttataactcaacacaattataataatattactttaaacacttgtgttgattataacatatatggcagatttggccaagggtttattactaatgtaactgactctgctgctagttataattatctagctgatgcagggttggctattttagacacttctggtgccatagacgtctttgttgtacaaggcgaatatggtcttaatttttataaggttaacccctgcgaggatgtcaaccaacagtttgtagtttctggtggtaacatagttggtgttcttacttctcgtaatgaaactggttctcagtttattgggaacaaattttatgttaaactcactaatgaaagtcgtcgtcacagacgttccattagtgaaaatgtcacaagctgtccatttgttagttatggcagattttgtattgaaccagatggttcattaaagacagtagtgccagaagagcttaaacagtttgtggcacctttacttaatgttactgaaagtgtactcatacctaacagttttaatttaactgttacagatgagtacatacaaacacgtatggataaagttcaaatcaattgcctgcaatatgtttgtggtaattcattggagtgtaggaagttatttcaacaatatggtcctgtctgtgacaacatattgtctatagtaaatagtgttggtcaaaaagaagatatggaacttttaaacttctattcttctactaaaccagctggttataatgcacctgtttttaataatattagtactggtgattttaatatttctcttttattaacaccacctaatagtcctagaggtcgttcttttatagaagatttgttatttacaagtgttgaaacagttggtttgccaactgatgctgaatataaaaaatgcacggcgggacctttgggcactcttaaagatcttatctgtgctagggaatataatggcttattagtactgccaccaattattacggctgatatgcaaacaatgtatactgcttccttagttggtgccatggcttttggtggtattacagcagcaggtgctataccatttgcaactcagatacaagctagaattaatcatttgggtattactcagtctctgttattgaagaaccaagagaagattgctgcttccttcaataaggccattggtcatatgcaggaaggttttagaagcacttcgctagcattacaacaggttcaagacgttgttaataagcagagtgctattcttatggaaactatgaattctcttaataagaattttggtgccatttcatcagtaattcaagacatttatgcgcaacttgatgcaattcaagcagatgcacaagttgatcgtcttattactggcagactctcttctctctcagtgctagcctctgctaagcagtctgagcacattagagtttcccaacaacgtgaattggccactcaaaaaattaatgagtgtgttaaatcacaatctaataggtatggattttgtggtagtggaagacatgttctttcgataccgcaaaatgcacctaatggtatagtgtttatacactttacttacactccacagagttttgttaatgttactgcaatagtgggtttttgtgtacagcctgctaatgctagtcagtatgcaatagtgcctgctaatggtagaggtatttttatacaagttaatggcagttactatatcactgcacgtgatatgtatatgccaagagacattactgcaggagatatagttacgcttacgtcttgtcaagcaaactatgttaatgtaaataaaaccgtcattactacatttgtagaagatgacgattttaattttaatgatgagttgtcaaaatggtggaatgacactaagcacgagctgccggactttgacgacttcaattatacagtacctatacttaatattagtggtgaaattgatcatattcaaggtgttatacagggtcttaatgactccattatagaccttgaacaactgtcaataatcaaaacttatattaaatggccttggtatgtttggcttgccataggctttgccattattatttttatccttatcttaggatgggtgtttttcatgacaggttgttgtggttgttgttgtggatgctttggtatcattcctctaatgagtaagtgtggtaagaaatcttcttattacacgacttttgataatgatgtggtaactgaacaatacagacctaaaaagtctgcttaa 加粗部分是基因信号肽前体，想使用另外的信号肽序列替代现有的信号肽前体序列，请问如何操作才能设计出能扩增出全段基因的引物，后续真核表达用，真诚求助。 [ Last edited by sunshinewood on 2013-5-17 at 19:02 ] |
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