应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » CHO细胞真核表达怎么总是假克隆呢
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 1015  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yuanalice

银虫 (小有名气)

[求助] CHO细胞真核表达怎么总是假克隆呢

CHO细胞的真核表达，采用了CMV，PCI以及pCDNA5三种载体，转染后48小时免疫荧光检测有表达，问什么加压后虽然有圆形的细胞克隆产生，但是在进行免疫荧光检测却没有目的蛋白的表达呢，毕业在即，怎么办呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-02-28 01:25:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robustli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuanalice: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-02-28 10:05:48
你做的是融合蛋白吗，如果是，有可能是你插入的序列没有插好，导致了移码阅读。如果不是，有可能是你得基因序列有问题，有可能有突变发生。另外你有没有加KOZ引导序列。
赞一下 回复此楼
immunologyparasite
2楼2013-02-28 02:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanalice

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by robustli at 2013-02-28 02:07:31
你做的是融合蛋白吗，如果是，有可能是你插入的序列没有插好，导致了移码阅读。如果不是，有可能是你得基因序列有问题，有可能有突变发生。另外你有没有加KOZ引导序列。

移码阅读的话，免疫荧光不可能有荧光呀，这个KOZ序列很重要吗，我在一些文献上看到过，这是一个真核表达使用的一致的序列吗，是不是直接连接到起始密码子的前面呀！
赞一下 回复此楼
3楼2013-02-28 10:05:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robustli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是的，没有的话，可能就不能翻译了，ccacc直接加在atg前面。
赞一下 回复此楼
immunologyparasite
4楼2013-03-01 01:13:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanalice

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by robustli at 2013-03-01 01:13:03
是的，没有的话，可能就不能翻译了，ccacc直接加在atg前面。

这个序列是通用的吗
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-01 21:44:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶倾意

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuanalice: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-03-04 08:42:17
kozak 序列是很重要，但是你也可以先去查一下你的基因序列（包括质粒图谱），因为有的时候，基因插入你的质粒之后，就已经有了Kozak序列，而且我觉得kozak 只是影响表达量高低而不是影响表达量有无。按照ｌｚ的描述，你是瞬时转染之后检测有目的蛋白，但是稳定转染之后就没有了？　
赞一下 回复此楼
自知者智 自胜者勇 自暴者弃 自强者成
6楼2013-03-02 16:06:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

希罗雅

银虫 (小有名气)
你好  你有CMV5的载体信息吗
赞一下 回复此楼
凡事学习
7楼2015-05-07 13:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuanalice 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:23 by hemengdong
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +13 洛神哥哥 2026-04-03 13/650 2026-04-05 17:27 by zzx2138
[考研] 282求调剂 +3 aaa车辆 2026-04-01 3/150 2026-04-05 17:03 by yulian1987
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大） +8 相信必会光芒万� 2026-04-05 10/500 2026-04-05 12:19 by Hdyxbekcb
[考研] 材料调剂 +9 革微桂 2026-04-04 9/450 2026-04-05 08:27 by 544594351
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 本科211 分数293请求调剂 +4 莲菜就是藕吧 2026-04-01 4/200 2026-04-04 22:32 by hemengdong
[考研] 302求调剂一志愿华中师范大学 +8 小江小江江江 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:50 by 蓝云思雨
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 学硕机械工程303求调剂 +6 无名所以叫吴明 2026-03-30 7/350 2026-04-03 16:48 by asdfzly
[考研] 289-求调剂 +4 这里是_ 2026-04-03 4/200 2026-04-03 14:23 by 1753564080
[考研] 一志愿华东理工大学，080500学硕，317分，求调剂 +13 s1145 2026-03-31 15/750 2026-04-03 11:44 by msi123
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 11/550 2026-04-02 10:52 by lnilvy
[考研] 考研调剂 +12 Amber00 2026-03-31 12/600 2026-04-02 09:04 by sanrepian
[考研] 一志愿北交大材料工程，总分358 +4 cs0106 2026-04-01 4/200 2026-04-02 07:42 by 尚水阁主
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-31 11/550 2026-04-01 09:43 by xiayizhi
[考研] 求调剂，一志愿北林食品与营养095500，301分，已过六级，有科研经历 +4 快乐储蓄罐 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭