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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 溶解在纸上的质粒转不进大肠杆菌怎么办。已经快要急的自杀了求好心人士解惑。
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abstars

新虫 (初入文坛)

[求助] 溶解在纸上的质粒转不进大肠杆菌怎么办。已经快要急的自杀了求好心人士解惑。

老师让我转一些质粒进大肠杆菌，本来是一件很容易的事情，我做的TOP10感受态验证了效率还是可以的。
但是！这个质粒是溶解在纸上的，我把圈出来的纸溶解在水中，怎么转都转不进去。用分光光度计测过浓度，浓度很低，OD260/280的值也很奇怪。因为浓度太低跑电泳当然也是跑不出来的。
已经做这个做了一个星期了，老师怀疑是我感受态效率不高，可是我转别的质粒即使很低浓度也可以长出来啊！我很怀疑那张破纸上到底有没有质粒！
求好心人士告诉我，有没有同样的从纸上得到质粒的情况，怎么才能有效转进去。跪求经验！！！
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1楼 2013-05-13 17:10:02
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abstars

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by babyzixin at 2013-05-14 22:17:21
同学您好，您的质粒是从向别人要的吧？我曾经也向法国的老外要过质粒，他把质粒放在whatman滤纸上。我是这样做的，把圈出来的滤纸剪下，溶解在无菌水中，大概5 min左右，离心1min,吸取液体，加入到100 uL感受态细胞 ...

谢谢 水加太多浓度太低了。。。
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3楼2013-06-16 20:42:27
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匿名

用户注销 (正式写手)
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2楼2013-05-14 22:17:21
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