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直接反转录的DNA可以与载体直接连接吗
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直接反转录的DNA可以与载体直接连接吗
直接反转录的DNA,即还没进行后续特异引物PCR,只是cDNA可以与载体连接吗?谢谢高位高手指点迷津!
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2013-05-11 21:00:25
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应该可以吧,我看师兄做的实验就是反转录然后直接连接转化呀
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2楼
2013-05-11 21:16:28
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245087116(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助!
2013-05-12 14:30:27
gyesang: 回帖置顶
2013-05-12 14:30:29
当然不行,反转录之后是单链的cDNA,只有PCR之后才能形成双链DNA,进而克隆
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2013-05-11 21:37:54
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3楼
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Originally posted by
酶切专家
at 2013-05-11 21:37:54
当然不行,反转录之后是单链的cDNA,只有PCR之后才能形成双链DNA,进而克隆
我想 cDNA不是一RNA为模板扩怎的RNA-DNA双链吗··· 难道不行吗?
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4楼
2013-05-11 21:42:25
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大哥,不会是RNA-DNA双链吧!不是有处理掉cDNA上结合的RNA么????
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2013-05-11 21:45:26
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这样做,有什么意义么????
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2013-05-11 21:46:21
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2楼
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Originally posted by
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at 2013-05-11 21:16:28
应该可以吧,我看师兄做的实验就是反转录然后直接连接转化呀
可能他用了一步法的试剂盒, 同一个管子里面RT完了紧跟PCR程序.
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7楼
2013-05-11 21:50:42
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千里两句
at 2013-05-11 21:45:26
大哥,不会是RNA-DNA双链吧!不是有处理掉cDNA上结合的RNA么????
要处理掉cDNA上结合的RNA吗?我按照试剂盒步骤没处理进行PCR也扩出来条带了啊?
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8楼
2013-05-12 11:45:07
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载体是双链DNA,cDNA复制为成为双链DNA才可以连接到载体上。
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9楼
2013-05-12 18:17:20
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