| 查看: 15362 | 回复: 20 | |||||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||||||
sunzhengwang铁虫 (小有名气)
|
[求助]
RNA A260/280>2 是神马情况？ 已有1人参与
|
||||||
|
好质量的RNA 260/280值应该在1.9-2.0， 但是最近提取的RNA A260/280>2，A260/230>2， 请问各位虫友，这是个神马情况？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生化实验经验积累 | 专业电子书 | 核酸生物学实验经验 | 【分子生物】EPI帖 |
| RNA提取 |
» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有51人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 分光光度计A260/A280 A260/A230 比值所代表意义
已经有0人回复
- RNA提取时，浓度4252.2，A260/280=1.99，但电泳跑不出RNA，原因是？
已经有22人回复
- 求助！肌肉RNA提取 A260/280竟然大于4，什么情况？
已经有2人回复
- 甜椒叶片RNA的提取
已经有6人回复
- RNA提取A260/A230小于2的问题
已经有3人回复
- 为什么提取RNA时出现一坨白色沉淀
已经有39人回复
- RNA的质量好坏标准
已经有8人回复
- RNA提取
已经有3人回复
- 提取椎间盘髓核组织RNA，A260/208＜1.5，A230峰值远高于A260、A280峰值,
已经有9人回复
- RNA定量时A260/A280范围
已经有1人回复
- RNA 提取如何保证质量
已经有17人回复
- Trizol 法 RNA提取失败 请虫友帮忙分析下 什么原因?该怎么办吖
已经有18人回复
- 大提基因组，测OD值有500ng/μl，但是跑胶没有条带，大家知道什么原因么？
已经有2人回复
- RNA 提取
已经有10人回复
- A260/A280和A260/A230的含义
已经有19人回复
- 【求助/交流】RNA浓度的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于RNA浓度和质量鉴定问题
已经有1人回复
- 【求助/交流】RNA鉴定时A260/280比值偏低怎么改进?
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于RNA提取的
已经有20人回复
chinatiger
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 4944.4
- 红花: 1
- 帖子: 2252
- 在线: 596.5小时
- 虫号: 95415
- 注册: 2005-10-03
- 专业: 细胞呼吸与代谢
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunzhengwang(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-10 13:00:10
gyesang: 回帖置顶 2013-05-10 13:00:24
sunzhengwang: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-10 15:16:13
1949stone: MolEPI+1, good 2013-05-11 20:30:21
感谢参与，应助指数 +1
sunzhengwang(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-10 13:00:10
gyesang: 回帖置顶 2013-05-10 13:00:24
sunzhengwang: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-10 15:16:13
1949stone: MolEPI+1, good 2013-05-11 20:30:21
|
如果在2.1之上，说明可能存在DNA污染。此外，单纯看比值意义不大，下列文字仅供参考： 1. A260nm 是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为 0.1 至 1.0。如果不在此范围，稀释或浓缩样品，使 之在此范围内；如果吸光度小于 0.05，检查是否存在操作因素（如移液不准确，样品内有悬浮物等）影响。 DNA 样品的 A260 吸光度值是否>0.1。（请注意，这个值跟仪器无关，核酸的吸光度必需大于 0.1，其值才 有效和可靠，因为样品中的杂质和颗粒这些不纯物的干扰通常会对光有一定吸收，其值<0.1）； 2. A280nm, A270nm 是蛋白最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8，纯 RNA 为 2.0。如果比值低，表示受到蛋白（芳香族）或酚类物质的污染，需要纯化样品。比值=1.5 相当于 50％ 蛋白质/DNA 溶液.酚的最大吸收峰在 270nm。 3. A230nm 是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯 DNA 和 RNA 的 A260/A230 比值为 2.5。若比值小于 2.0 标明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。A230 产生 负值主要是由于在很低 DNA 浓度的溶液中的一些其他成分的干扰所导致的。在下一个测定中，需要降低样 品的稀释度，A230 的负值会被校正。 4. A320nm 或 A340nm 为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。该值应该接近0.0。如果不是，标明溶液中有悬浮物，需要纯化样品。纯样品的A320一般是 0。 5. A260/A280和A260/A230 是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA，在pH7-8.5 下A260 / A280的比值应该在2.0 或2.5。纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍盐）等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。 当 0.5％BSA蛋白质污染时，蛋白污染会导致260和280的数值都下降，其净结果是260/280比值下降，但260/280的比值变化并不显著，正如分子克隆3所说。但蛋白残留会导致230的数值显著上升，显著影响260/230的比值。也就是说，如果RNA样品的260/280＝1.7，260 /230＝0.5，那么就应该考虑污染原因不是胍盐残留，而是蛋白残留. 其他： 用分光光度计测量RNA时，用水而不是用TE 缓冲液稀释RNA样品会造成A260/A280比值下降。原因是低离子强度和低pH溶液会增加280 nm处的光吸收值。 加氯仿离心后取上清的时候千万不要贪多 ，那样就很容易被蛋白污染，所以现在一般取400ul左右。 当260/230<1时，只有两种情况。一是胍盐污染，二是蛋白污染。 |
15楼2013-05-10 11:39:21
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2013-05-09 09:31:26
tingting0531
铁虫 (正式写手)
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 554.7
- 散金: 40
- 帖子: 303
- 在线: 92小时
- 虫号: 2359627
- 注册: 2013-03-19
- 性别: MM
- 专业: 作物栽培与耕作学
3楼2013-05-09 21:12:47
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
4楼2013-05-09 22:03:31
5楼2013-05-09 22:22:51
sunzhengwang
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 274.3
- 散金: 32
- 帖子: 92
- 在线: 38.6小时
- 虫号: 1645929
- 注册: 2012-02-26
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2013-05-10 08:09:47
sunzhengwang
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 274.3
- 散金: 32
- 帖子: 92
- 在线: 38.6小时
- 虫号: 1645929
- 注册: 2012-02-26
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2013-05-10 08:11:13
springnamao
金虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 685.9
- 散金: 13
- 红花: 3
- 帖子: 84
- 在线: 43.8小时
- 虫号: 2439931
- 注册: 2013-04-28
- 性别: MM
- 专业: 免疫反应相关因子与疾病
8楼2013-05-10 08:46:25
9楼2013-05-10 09:30:54
jiaoxiayoulu
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 38.6
- 散金: 5
- 红花: 1
- 帖子: 96
- 在线: 36.7小时
- 虫号: 2102897
- 注册: 2012-11-02
- 专业: 微生物遗传育种学
10楼2013-05-10 10:50:29
