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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 甜椒叶片RNA的提取
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751221657

铁虫 (初入文坛)

[求助] 甜椒叶片RNA的提取 已有2人参与

我用的TRIZOl法提的RNA：1、液氮磨样；2、加TRIZOL，混匀，静置5min，离心5min；3、取上清加350ul的氯仿，混匀，静置5min，离心15min；4、去上层水相，加入等体积的异丙醇，冰上沉淀30min，离心10min；5、用75%乙醇洗沉淀，倒掉乙醇；6、晾干，水溶解
1、在异丙醇沉淀时，有的管没有沉淀，倒掉异丙醇，加入无水乙醇，出现沉淀，是在怎么回事？
2、A260/A280的比值在1.0左右，比值不对，是为什么，怎么解决？
3、我师姐做的是番茄叶片的，她的沉淀总是有色素干扰，怎么去除？
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1楼 2014-08-29 10:27:03
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令狐少陈

铜虫 (小有名气)
我也提完总是有叶绿素，发墨绿色，求解
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多多交流，海纳百川
2楼2014-08-29 10:50:52
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毅坚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
751221657: 金币+2, ★有帮助, 用氯仿多次抽提了，不成功 2014-09-14 19:52:45
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-11-02 22:25:28
你好，色素问题可以用氯仿多次抽提解决。至于DNA污染问题，吸液时不要贪多，如果条件允许，可以加入DNAnaseI.
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3楼2014-09-04 00:07:25
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-11-02 22:25:35
可以采用挂硅胶吸附柱的方式，乙醇冲几下，然后洗脱

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751221657
4楼2014-09-04 06:12:57
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751221657

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by bio_sci at 2014-09-04 06:12:57
可以采用挂硅胶吸附柱的方式，乙醇冲几下，然后洗脱

从哪步开始用吸附柱，有具体步骤吗
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5楼2014-09-14 19:54:23
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

用试剂盒提的效果肯定不如手提的好，建议自己配试剂，手提。

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6楼2014-11-02 18:03:21
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 毅坚 at 2014-09-04 00:07:25
你好，色素问题可以用氯仿多次抽提解决。至于DNA污染问题，吸液时不要贪多，如果条件允许，可以加入DNAnaseI.

氯仿对付叶绿素都不OK，色素不是这么除的。

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7楼2014-11-02 18:04:22
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