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751221657

铁虫 (初入文坛)

[求助] 甜椒叶片RNA的提取 已有2人参与

我用的TRIZOl法提的RNA:1、液氮磨样;2、加TRIZOL,混匀,静置5min,离心5min;3、取上清加350ul的氯仿,混匀,静置5min,离心15min;4、去上层水相,加入等体积的异丙醇,冰上沉淀30min,离心10min;5、用75%乙醇洗沉淀,倒掉乙醇;6、晾干,水溶解
1、在异丙醇沉淀时,有的管没有沉淀,倒掉异丙醇,加入无水乙醇,出现沉淀,是在怎么回事?
2、A260/A280的比值在1.0左右,比值不对,是为什么,怎么解决?
3、我师姐做的是番茄叶片的,她的沉淀总是有色素干扰,怎么去除?
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令狐少陈

铜虫 (小有名气)

我也提完总是有叶绿素,发墨绿色,求解
多多交流,海纳百川
2楼2014-08-29 10:50:52
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毅坚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
751221657: 金币+2, 有帮助, 用氯仿多次抽提了,不成功 2014-09-14 19:52:45
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-11-02 22:25:28
你好,色素问题可以用氯仿多次抽提解决。至于DNA污染问题,吸液时不要贪多,如果条件允许,可以加入DNAnaseI.
3楼2014-09-04 00:07:25
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)



gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-11-02 22:25:35
可以采用挂硅胶吸附柱的方式,乙醇冲几下,然后洗脱

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2014-09-04 06:12:57
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751221657

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by bio_sci at 2014-09-04 06:12:57
可以采用挂硅胶吸附柱的方式,乙醇冲几下,然后洗脱

从哪步开始用吸附柱,有具体步骤吗
5楼2014-09-14 19:54:23
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

用试剂盒提的效果肯定不如手提的好,建议自己配试剂,手提。

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6楼2014-11-02 18:03:21
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 毅坚 at 2014-09-04 00:07:25
你好,色素问题可以用氯仿多次抽提解决。至于DNA污染问题,吸液时不要贪多,如果条件允许,可以加入DNAnaseI.

氯仿对付叶绿素都不OK,色素不是这么除的。

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7楼2014-11-02 18:04:22
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