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foxhuli

木虫 (正式写手)


[交流] cDNA凝胶电泳结果分析

这是我的cDNA PCR结果,麻烦大家帮忙分析一下,因为我们实验室几乎不涉及这一块,我也是偶然做这一部分。从人肝癌细胞中提取的RNA,然后经RT-PCR,逆转录成cDNA。电泳我用的是1.5%琼脂糖,1*TBE,65V,90min,每孔10μl左边两个是RNA,中间是1kb mark,右边两个是pcr产物,有专业人士能看一下这是否p成功了吗?

RNA,DNA.jpg
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foxhuli

木虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by renzhiq at 2013-05-01 19:26:03
你的表述有点问题,没有明白你是用cDNA做模板进行pcr还是直接检测反转录的情况,cDNA质量(很少有人会这么做)
不管怎么样,您右边都是没有产物的。实验没有成功!

就是用RNA进行逆转录的啊,那如何检测是否成功呢
4楼2013-05-01 22:11:00
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renzhiq

木虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
foxhuli(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-05-01 21:03:32
你的表述有点问题,没有明白你是用cDNA做模板进行pcr还是直接检测反转录的情况,cDNA质量(很少有人会这么做)
不管怎么样,您右边都是没有产物的。实验没有成功!
2楼2013-05-01 19:26:03
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foxhuli

木虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by renzhiq at 2013-05-01 19:26:03
你的表述有点问题,没有明白你是用cDNA做模板进行pcr还是直接检测反转录的情况,cDNA质量(很少有人会这么做)
不管怎么样,您右边都是没有产物的。实验没有成功!

就是用RNA进行逆转录的啊,那如何检测是否成功呢
3楼2013-05-01 22:10:36
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andywang6137

木虫 (著名写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
foxhuli(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-05-02 12:05:17
为什么不把图像正放过来呢?检测也是直接电泳检测RNA,几乎没有人检测反转录后的cDNA,反转录试剂还是比较贵的。右边2个孔只有引物二聚体,没有PCR产物。
6楼2013-05-02 08:36:54
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