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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » cDNA凝胶电泳结果分析
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foxhuli

木虫 (正式写手)

[交流] cDNA凝胶电泳结果分析

这是我的cDNA PCR结果，麻烦大家帮忙分析一下，因为我们实验室几乎不涉及这一块，我也是偶然做这一部分。从人肝癌细胞中提取的RNA，然后经RT-PCR，逆转录成cDNA。电泳我用的是1.5%琼脂糖，1*TBE，65V，90min，每孔10μl左边两个是RNA，中间是1kb mark，右边两个是pcr产物，有专业人士能看一下这是否p成功了吗？

RNA,DNA.jpg
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1楼 2013-05-01 17:11:43
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
foxhuli(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-02 12:07:08
楼主PCR的目的片段式多长呢？RNA有降解，但是逆转录还是可以逆出cDNA出来，逆了cDNA后可以P个内参（GAPDH）来检测下cDNA是否有问题。如果没有问题就可以进行PCR你的目的条带了。。。但是首先你得知道的目的片段是多长啊。。。
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10楼2013-05-02 10:09:36
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renzhiq

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
foxhuli(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-01 21:03:32
你的表述有点问题，没有明白你是用cDNA做模板进行pcr还是直接检测反转录的情况，cDNA质量（很少有人会这么做）
不管怎么样，您右边都是没有产物的。实验没有成功！
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2楼2013-05-01 19:26:03
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foxhuli

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by renzhiq at 2013-05-01 19:26:03
你的表述有点问题，没有明白你是用cDNA做模板进行pcr还是直接检测反转录的情况，cDNA质量（很少有人会这么做）
不管怎么样，您右边都是没有产物的。实验没有成功！

就是用RNA进行逆转录的啊，那如何检测是否成功呢
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3楼2013-05-01 22:10:36
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foxhuli

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by renzhiq at 2013-05-01 19:26:03
你的表述有点问题，没有明白你是用cDNA做模板进行pcr还是直接检测反转录的情况，cDNA质量（很少有人会这么做）
不管怎么样，您右边都是没有产物的。实验没有成功！

就是用RNA进行逆转录的啊，那如何检测是否成功呢
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4楼2013-05-01 22:11:00
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