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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做PCR时 混合液用管
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sherry_wang

木虫 (正式写手)

[交流] 做PCR时 混合液用管

为了保证PCR每管成分、含量相同，做PCR时，一般会将各成分预先混匀，再分装到各管。以前一直用的是OXYGEN的1.5ml 管，后来觉得太浪费了，就买了一包国产1.5ml 管，没想到，最近一个基因都扩不出来，郁闷了。为什么PCR管可以买国产的，1.5ml 管就不行，PCR体系应该都比较稳定了，可为什么一个都扩不出来呢？
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1楼 2013-04-25 10:32:44
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北极星※

金虫 (小有名气)
★
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觉得是试剂是不是出问题了 管子出问题的情况较少
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8楼2013-04-26 22:44:21
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
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sherry_wang: 金币+1 2013-04-25 16:36:57
gyesang: 金币+1, 鼓励发贴交流，为楼主问题解决提供可能的线索！ 2013-04-25 21:30:22
PCR没做出来可能有其它原因吧，我觉得不应该是做master mix管子的事情。
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2楼2013-04-25 12:35:00
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chunhua0312

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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sherry_wang: 金币+1 2013-04-25 16:37:02
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-04-25 16:50:22
用过国产的，挺稳定的，估计不是这个原因。
可以再配制一批混合液，分别用国产和OXYGEN的分装，再同时PCR试一试，估计，两个就都能出来了。
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3楼2013-04-25 12:38:23
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sherry_wang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-25 12:35:00
PCR没做出来可能有其它原因吧，我觉得不应该是做master mix管子的事情。

嗯 还在找原因
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4楼2013-04-25 16:35:52
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sherry_wang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chunhua0312 at 2013-04-25 12:38:23
用过国产的，挺稳定的，估计不是这个原因。
可以再配制一批混合液，分别用国产和OXYGEN的分装，再同时PCR试一试，估计，两个就都能出来了。

嗯 谢谢 再做做看
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5楼2013-04-25 16:36:09
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Renavatio

木虫 (小有名气)
★ ★
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sherry_wang: 金币+1 2013-04-25 16:47:17
myprayer: 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-25 16:50:35
绝对不是国产管的问题，我们菌落PCR的时候配MIX就是国产管，没出现过问题！
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6楼2013-04-25 16:39:06
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sherry_wang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Renavatio at 2013-04-25 16:39:06
绝对不是国产管的问题，我们菌落PCR的时候配MIX就是国产管，没出现过问题！

再找找原因 难道是takara酶的问题 怎么能突然就扩不出来了呢
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7楼2013-04-25 16:47:14
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andywang6137

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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sherry_wang: 金币+1, 恩 有可能 2013-04-28 09:52:53
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-04-28 13:28:03
主要看dNTP，酶，引物，模板。管子可能性不大。
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9楼2013-04-28 09:23:59
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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sherry_wang: 金币+1, 现在基本可以排除管子的问题了 再找找其他原因 2013-04-28 09:53:31
gyesang: 金币+1, 鼓励发贴交流，为楼主问题解决提供可能的线索！ 2013-04-28 13:28:14
应该不是管子的问题吧，你可以做一个对比，看看结果。
我经常配体系的时候就用国产1.5ml的管子
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10楼2013-04-28 09:33:13
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sherry_wang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 北极星※ at 2013-04-26 22:44:21
觉得是试剂是不是出问题了 管子出问题的情况较少

缓两天再做 说不定一下子就出来了 呵呵
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11楼2013-04-28 09:52:36
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dafeizizhu

铜虫 (小有名气)
★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-04-28 13:28:24
我可以肯定地告诉你，管子不是问题。影响PCR的因素很多，至少有十来个，哪个有问题就会没有PCR结果。
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12楼2013-04-28 10:32:52
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sherry_wang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by dafeizizhu at 2013-04-28 10:32:52
我可以肯定地告诉你，管子不是问题。影响PCR的因素很多，至少有十来个，哪个有问题就会没有PCR结果。

说的对啊 以前一直扩的好好的 换了管子和酶就不行 所以第一反应就是管子的问题 再找找原因 呵呵 谢谢
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13楼2013-04-28 21:49:51
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alicelchf

木虫 (著名写手)
axygen吧 ？呵呵
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14楼2014-01-03 17:12:51
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sherry_wang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by alicelchf at 2014-01-03 17:12:51
axygen吧 ？呵呵

老帖了 呵呵 我写错了
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15楼2014-01-06 10:42:01
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