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诱导表达GST融合蛋白,结果分子量少了26KD,刚好是GST的分子量
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将目的基因插入到pGEX-4T-1载体上，然后将构建好的重组质粒转化入BL21（DE3）感受态细胞中，用终浓度为0.25mM的IPTG诱导表达6h。目的基因25KD，本来用IPTG诱导后应该表达的融合蛋白约为51KD，但是很奇怪，在进行SDS-PAGE时，在25KD处出现很明显的条带，而51KD处却无明显条带。貌似是GST被自动切除了，或者是启动子跳过GST而直接翻译目的基因了？这是什么原因呀，百思不得其解？？？测序表明重组质粒是没有错误的。。。 |
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3楼2013-04-24 10:48:01
酶切专家
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 96 (初中生)
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- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2013-04-22 21:37:25
请问你这个问题解决了吗最后，我也碰见了一摸一样的，只表达了GST标签，测序是正确的。4楼2022-02-07 19:48:49
