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诱导表达GST融合蛋白,结果分子量少了26KD,刚好是GST的分子量
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将目的基因插入到pGEX-4T-1载体上,然后将构建好的重组质粒转化入BL21(DE3)感受态细胞中,用终浓度为0.25mM的IPTG诱导表达6h。目的基因25KD,本来用IPTG诱导后应该表达的融合蛋白约为51KD,但是很奇怪,在进行SDS-PAGE时,在25KD处出现很明显的条带,而51KD处却无明显条带。貌似是GST被自动切除了,或者是启动子跳过GST而直接翻译目的基因了?这是什么原因呀,百思不得其解???测序表明重组质粒是没有错误的。。。 |
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请问你这个问题解决了吗最后,我也碰见了一摸一样的,只表达了GST标签,测序是正确的。