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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

[求助] 动物组织DNA提取 已有2人参与

急求动物组织DNA提取操作步骤及相关溶液配制方法。PS:下官是在尝试了两种种提取试剂盒之后,迫不得已选择这个方法的,各位大侠帮帮忙吧!
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轨未

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by hechuguiqu11 at 2013-04-16 19:18:58
是酒精保存的,研磨前晾干。这些操作方法提取另外一个物种时很顺利。换了一个物种就不行了。样品比较新鲜。。。...

另个物种很好。这个就没有。。。略诡异
检验的时候条带不亮,还是彻底没有。如果亮度不足也没关系。PCR没问题的
today is present
7楼2013-04-16 19:21:37
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查看全部 19 个回答

轨未

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-04-16 16:46:16
对于楼主尝试了两种试剂盒都失败,表示遗憾。
用的什么牌子的失败了呢。什么组织,肝脏?肌肉?
提DNA一般来说是最靠谱的吖,不会失败的吧。
说说你的操作处理,尤其是样品用什么保存的。说不定能发现失败的原因。
today is present
2楼2013-04-16 14:44:12
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
取0.2g左右的肌肉于2mL的玻璃匀浆器中,加人450μLSTE液匀浆,倒人1.5mL Ep 管, 加20% SDS25μL,蛋白酶K(10mg/mL)25μL ,50oC消化过夜,酚、氯仿和异戊醇进行常规基因组DNA抽提 ,基因组DNA置4oC冰箱中保存备用。
3楼2013-04-16 17:16:57
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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 轨未 at 2013-04-16 14:44:12
对于楼主尝试了两种试剂盒都失败,表示遗憾。
用的什么牌子的失败了呢。什么组织,肝脏?肌肉?
提DNA一般来说是最靠谱的吖,不会失败的吧。
说说你的操作处理,尤其是样品用什么保存的。说不定能发现失败的原因 ...

我提取的动物肌肉组织,实验操作都是按照试剂盒说明书进行的,只是最后溶解DNA时用的100μL ddH2O,4℃保存。DNA检测都是在提取出来之后就做的,用H2O也行的吧?
4楼2013-04-16 18:58:12
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